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[请教] 冰冻切片前的组织怎样保存?(在线等) [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-20 11:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
组织我已经固定、脱水处理过了,但是由于假期放假,想放置一个月后再做免疫组化,请问该如何保存才能保证组织标本的尽可能完整呢?
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沙发
发表于 2011-1-20 12:53 |只看该作者
可不可以包埋在蜡或者其他的材料里面。用的时候再切片做免疫组化
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藤椅
发表于 2011-1-20 13:02 |只看该作者
这就是做石蜡包埋的前期步骤啊 做好石蜡块 别说是一个月 就是一年也没有问题
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板凳
发表于 2011-1-20 13:03 |只看该作者
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既然要做冷冻切片,那就不会包埋在石蜡里面了。1 c1 q$ |6 L1 Y
是这样的:脱水后,用吸水纸洗净残留的液体,然后TTC包埋在模子中,放-80度或者-20度都可以,完全没有问题的。做文章时,一般为了补充实验,不会把所有的标本都切完,留一半这样保存,补充数据用。
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报纸
发表于 2011-1-20 13:04 |只看该作者
请问是什么组织?! b# F0 W" \' \
冰冻切片的话一般新鲜组织就行,如果是脑的话可能需蔗糖平衡这一步,要求组织越新鲜越好,可以先不固定,冰冻切片后再进行固定。所以的话要么取材后马上做冰冻,要么置于液氮中保存,等有空再做。放固定液先固定也是可以的,但时间久了的话抗原损失就越大,不利于抗体检测。! i5 y% q% Q0 X) \7 u
但是楼主说已经固定脱水过了,这点我就非常不明白了,既然固定脱水了,那下面就是做石蜡切片了。为何又说冰冻?还有个疑问就是,不知道楼主的脱水程序是否恰当,如果不恰当的话那标本就废了。
, @/ g7 F+ p! D! A4 K% C所以建议楼主实验前先弄清楚再做,因为标本可能是需要很久时间,很多人力无力才有的。所以要珍惜~~!& ]% Q) i% V- h" M) d2 P1 ?( U
免疫组化可以用石蜡切片,也可以做冰冻切片,其实从某种意义上讲,石蜡还是比冰冻要好看得多。
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发表于 2011-1-20 13:08 |只看该作者
你这是做石蜡切片的程序哦,后透明,浸蜡半天就搞定啦!冰冻用的新鲜组织
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优秀会员 金话筒

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发表于 2011-1-20 13:12 |只看该作者
泡在30的蔗糖,4度,一个月无碍
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发表于 2011-1-20 14:05 |只看该作者
我是用30%的蔗糖溶液脱水,组织是小鼠的所有脏器,我们一直都是冰冻切片后做免疫组化,HE染色,这次时间太紧,所以没有及时切片,如果4度可以放置1个月的话,那就最好了。
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金话筒 优秀会员 新闻小组成员 帅哥研究员

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发表于 2011-1-20 14:52 |只看该作者
我做过石蜡(用到一边热融石蜡、另一边冰冻的台子)和另一种是把组织和固定物填充到模具里然后放在液氮里固定的两种组织切片方法。感觉都可以放很久,用的时候再切片……具体能放多久就不知道了……
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发表于 2011-1-20 15:23 |只看该作者
我也想请教一下,如果骨组织做冰冻切片,取材后如何处理呢?谢谢!
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