诱导成纤维细胞为ipsc时Oct-3/4-, Sox2-, Klf4- and c-Myc因子病毒液的量？

jefferson

严格的说,测病毒滴度后,按照病毒:细胞数=4~5的比例加. 参见如下文献An Improved Method for Generating and Identifying Human
# S$ V7 }& e& L+ j6 a; |( LInduced Pluripotent Stem Cells. 病毒上清要保存须置于-80度低温.) l$ y# b7 ~2 R! T6 O$ [& o
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但是貌似要严格的做到这个比例并不容易,而且确实病毒低温保存后活性会降低, 所以我们每次做时都同时做几线, 将新鲜病毒上清按照不同的量等比例混合, 然后加到相同量的细胞中感染.* _$ c  U1 C) y+ N

' E: e2 P* D. I* m' ]不过问题是,目前我还没诱导出阳性克隆,不知道是不是这个原因.