谁做过干细胞移植，有个小小的问题

zxdlala

GFP转染之后，有一定的转染率，往模型回输干细胞悬液是需要将转染成功的细胞分出来回输，还是转染上的和未转染上的一起回输？

hcluo

FACs 分选阳性GFP细胞。

zxdlala

天啊，那转染率低的话我得养多少细胞才够用啊

西瓜太郎

估计转染到一定比例的就差不多了吧  好像要达到80%以上
! t3 _9 Y9 u7 r. F' J

zhangzhiyou

你跟我做的差不多呀 我是在你的基础上再做NT-3修饰的神经干细胞移植。荧光显微镜下大致定量 不一定百分之百。顺便问句你是向哪里移植 侧脑室 脑内 还是血液内

zhangzhiyou

一般是要筛选的阴性的都去掉的

zhangzhiyou

阳性率低也没事情的 你可以继续培养阳性细胞嘛 传上三四代就可以移植了。

zxdlala

zhangzhiyou 发表于 2011-2-23 22:06
6 `+ C2 H1 r6 F& e1 i' Q+ f4 ^. }阳性率低也没事情的 你可以继续培养阳性细胞嘛 传上三四代就可以移植了。

) I0 y0 T: S* ?1 _* b! _7 }7 P你是说转染后再继续培养
* p+ @9 u5 [% \" V* \: ~9 g% x+ C
) J% ?  K1 b% ?不是转染后直接移植吗

zxdlala

zhangzhiyou 发表于 2011-2-23 22:04
  ~# P9 n9 H& y5 J5 b9 D你跟我做的差不多呀 我是在你的基础上再做NT-3修饰的神经干细胞移植。荧光显微镜下大致定量 不一定百分之百 ...

/ S6 [" m0 e* l9 w9 M
我移植到子宫内，NT-3修饰是起个什么作用呢

zhangzhiyou

是转染后的细胞在培养传代，这样增加所需细胞数量，NT-3即神经营养因子3 神经营养因子类，功能不止一个，我用的是他能促进神经干细胞定向胆碱能神经元分化。