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[请教] 关于蛋白提纯 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-2-25 23:11 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问大家,我表达的几个蛋白带有GST标签,是不是一定以包涵体形式表达啊?如果是包涵体的话,要怎么纯化呢?用超声波破碎后细胞后,要离心还是不要离心?离心后沉淀岂不是既有细胞碎片又有包涵体吗?应该怎么提纯呢。。。
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沙发
发表于 2011-2-26 08:51 |只看该作者
包涵体的形成也算是比较复杂的过程,这个不好说。炒成破碎后可以离心,把上清和沉淀同时进行SDS-PAGE,看你目的蛋白是否存在于上清,之后再确定是否进行包涵体复性,或是其他洗涤.
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藤椅
发表于 2011-2-26 08:52 |只看该作者
订正:炒成破碎修为超声破碎
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板凳
发表于 2011-2-26 10:30 |只看该作者
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0 \$ [, n+ M- Q( |( f沉淀如何点样呢?有一篇文章说那几种蛋白以包涵体形式表达,我的同门之前验证过上清中确实含有,但没有验证包涵体,我想验证一下,而且包涵体本身不是挺纯的吗,应该是比较好提纯的吧~~
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