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pingzongyunlan

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楼主

发表于 2011-2-25 23:11 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请问大家，我表达的几个蛋白带有GST标签，是不是一定以包涵体形式表达啊？如果是包涵体的话，要怎么纯化呢？用超声波破碎后细胞后，要离心还是不要离心？离心后沉淀岂不是既有细胞碎片又有包涵体吗？应该怎么提纯呢。。。

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沙发

发表于 2011-2-26 08:51 |只看该作者

包涵体的形成也算是比较复杂的过程，这个不好说。炒成破碎后可以离心，把上清和沉淀同时进行SDS-PAGE，看你目的蛋白是否存在于上清，之后再确定是否进行包涵体复性，或是其他洗涤.

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fananran2003

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藤椅

发表于 2011-2-26 08:52 |只看该作者

订正：炒成破碎修为超声破碎

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pingzongyunlan

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板凳

发表于 2011-2-26 10:30 |只看该作者

回复 fananran2003 的帖子/ S @/ u8 C7 q$ O

沉淀如何点样呢？有一篇文章说那几种蛋白以包涵体形式表达，我的同门之前验证过上清中确实含有，但没有验证包涵体，我想验证一下，而且包涵体本身不是挺纯的吗，应该是比较好提纯的吧~~

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