请教关于内毒素测定的问题！

maxiaona

我们需要对所培养的细胞进行内毒素检测，有没有哪位高手做过请指教？! P5 U' M& \; \# i! b+ E' @
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打算用厦门鲎试剂的内毒素检测试剂盒，请问有人用过啊？想了解下关于标准曲线的问题？

ljzmy82

还是用科德角的产品能得到比较准确的结果，国内的不是很好用

金戈

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/ k: p( G9 e' d2 M% O( N
2 Q4 m$ {/ S4 v" `2 a& @( M2 k厦门这个性价比比较高。很便宜。鲎试剂应该说国产的不比国外的差。东方鲎是相当有名的。尤其是福建地区。所以厦门的鲎试剂还是没有问题的，老牌。我用的就是这个。
. k, e" Q2 {4 [) @, U$ p他们有不同浓度标准的检测试剂，这是定性的。阳性的会凝固成固态。同时买一个阳性内毒素工作品。做阳性对照。
& s6 b; K( t" g$ v如果你要测定具体浓度，你可以有两种方案。
3 e, H; Z2 ?/ ~. e( M5 s; RA：买一系列不同浓度的检测试剂 如 0.2U/ml 0.5U/ml 等等 测定你的标本属于那个阳性>哪个值: D/ l& l$ C. E
B：选定一个常用的浓度，通过稀释你的样品进行测定 可以得出你的结果。

金戈

回复 ljzmy82 的帖子0 H$ y% O1 w- n$ ?- s: E) J, t

9 ^6 C0 m' j1 n8 M' D  H, y( z不是很同意您的观点。我曾经用过美国的美洲鲎试剂，相当贵，也没见得就比我们国内的东方鲎试剂强。国产的有些东西比如制造工艺是跟进口有差距，但并不是什么都不如人家的。东方鲎可是很早就出自中国 很早就有名的了 所以我个人认为 我支持国货。：）
, B4 v; h# y5 t, K+ i$ ^$ m个人观点 请别介意 。：）

maxiaona

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  K0 H8 J4 {- O1 ?/ G. g6 n. l
' [( f" {/ }# v5 y$ I- B0 N请教一下，我们是打算测贴壁培养的细胞的内毒素，不确定是用培养基还是用细胞悬液来测定，向您请教一下！

金戈

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5 X' i0 y3 Z7 o$ s* H5 J1 a0 o( F: y& }' I6 x4 J, d3 p
如果你是用厦门的鲎试剂的话，可以用细胞悬液。如果是阴性就是阴性 阳性就是阳性
- J  e# b; E4 T: j/ g% v如果你用的美洲的鲎试剂，估计你只能用上清液了，因为细胞悬液假阳性率太高。几乎全是阳性。

清影

回复 maxiaona 的帖子2 K7 m% V2 [/ f/ ?

* w* E, f" J. f$ b' U内毒素检测方法有凝胶法和光度法，浊度法。药典有明确的指出这几种方法发生不一致时以凝胶法为准。所以，我觉得你应该购买厦门鲎试剂厂的鲎试剂，用凝胶法做内毒素检测。非常简单而且成本比光度法低.1 j( {! W5 v" z3 d$ i5 P) I
再者你要检测细胞悬液的内毒素吗？检测结果不可信的！因为细胞本身分泌很多因子，加上培养基和血清，干扰因素太多，检测结果不可信！除非你先做好干扰验证实验！" ~4 ?1 J! M/ d1 Y1 t
我个人认为在细胞培养中要着重控制好原辅料及试剂的内毒素值，在之后的细胞培养中即便内毒素富集，只要你制定好限值，之后就没有问题了！

IVY-307

个人觉得厦门鲎试剂的性价比高点，所以我已经订了他们家的。但我觉得其中的显色基质法是最理想的。不过内毒素的检测也是非常的麻烦。到底是检测细胞悬液还是培养上清还真不清楚，培养上清中同样含有细胞分泌的一些因子。

jxydiandian

我们实验室就是用的厦门的鲎试剂，检测的是培养上清

xuehu20

厦门鲎试剂性价比还是比较高的，但是就是使用上繁琐了一些，又是检测用水，又是检测用试管的，相对说来国外的鲎试剂相对说来使用上要方便多了。总之，追求性价比选择国内的，追求使用方便选择国外的。