干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 17111|回复: 5
go

请教BMSCs诱导为软骨细胞的诱导液 [复制链接]

Rank: 1

积分
威望
5  
包包
205  
楼主
发表于 2011-3-2 21:55 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
问题同上。

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1464 
威望
1464  
包包
5294  

优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2011-3-3 09:09 |只看该作者
软骨细胞诱导液:/ B0 |7 S# ]( c
DMEM10 ng/ml TGF-β1
: e$ q# q7 F7 o( e; e0.1uM 地塞米松
5 U+ G$ A$ T5 ~50 mg/ml 维生素C
, R% i' S# a6 W. `8 t+ h' o同时以未诱导MSCs作为对照。培养箱内进行培养,每3-4d 换液一次。诱导至21d后,进行相应检测。+ O5 R& x/ j9 H% D! k) y
2.        组织化学和免疫组织化学分析
) E- Q- {9 U2 b* ?6 M  Y) L  c1)        显微镜观察:在倒置显微镜下,MSCs成软骨诱导分化后,细胞胞体变圆,胞质减少。+ G* Q) M0 k9 g* W$ u& B, z4 m
2)        番红O染色:诱导分化14d后,移出培养基,生理盐水/PBS洗12孔板一次,4%多聚甲醛固定30min,PBS洗2次,1%番红O染色约3min,蒸馏水洗3次,95%乙醇洗3遍,光学显微镜下观察并采集图像。3 e. B- p# {6 a" i& V
3)        甲苯胺兰染色:染色2-4h。
" r/ d9 B/ j. z9 Z9 K( {. a4)        阿利辛兰染色:染色0 y! I- T, f& a: |" Z7 M9 X" g# {
5)        Ⅱ型胶原免疫组织化学染色:  q( }. l( n# l( S* B! ~: q
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 20 + 30 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 20  包包 + 30   查看全部评分

Rank: 2

积分
86 
威望
86  
包包
328  
藤椅
发表于 2011-3-3 09:58 |只看该作者
楼上正解,俺已经无话可说了。

Rank: 2

积分
277 
威望
277  
包包
31  

优秀会员

板凳
发表于 2011-3-3 10:28 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 luoziwei 的帖子& _6 {% f  x9 Z' `" R
5 t8 n/ T. z( A" D
请问,加入铺12孔板,大概每孔多少细胞合适呢?谢谢!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1464 
威望
1464  
包包
5294  

优秀会员 金话筒

报纸
发表于 2011-3-3 13:28 |只看该作者
回复 tjutiger 的帖子2 O, ^! k9 s: M) x$ P: |
# F  R' M$ e! v: ~/ z- S
12孔板的我没做过,我做过24孔板的,每孔需要10的5次方,做软骨分化的细胞要求较多,因为是无血清培养诱导嘛
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
102 
威望
102  
包包
313  
地板
发表于 2011-3-6 20:56 |只看该作者
为什么不用先离心成一个组织球培养呢?还有维C半衰期太短了,最好用L-ascorbic acid-2-phosphate。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-6-14 23:42

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.