请问有人做过脐带来源干细胞的神经分化吗？

arwen

我用的配方是DMEM培养基中加入10%的胎牛血清，0.05 U/mL 青霉素，0.05 mg/mL 链霉素，1mM的bd cAMP, 0.5mM的 IBMX, 25 ng/ml NGF, 2.5 μg/ml 胰岛素.但细胞死的很多，我用的是第2代的，对照组细胞长得很好。怀疑是诱导剂的问题，因为我之前用地塞米松、IBMX和胰岛素进行成脂诱导的时候，细胞也是死得很多，后来把低糖DMEM换成高糖的，细胞才存活下来，不过分化为脂肪细胞的还是很少。我想问题是不是出在IBMX和胰岛素上面？毕竟这两种成分都是相同的，可能是它们对细胞有毒性。是不是我换一种培养基比较好？6 x5 q: ]# G8 C9 [& `# ^! X
此外，请问有谁用配方进行过诱导？BHA和DMSO这类化学配方对细胞也不好，而RA和NGF诱导的分化率比较低；EGF和bFGF能让细胞形成细胞球，处理起来比较麻烦。我看到国内有人用bFGF和N2联合诱导，分化率挺高的，不知道这里有没有人做过？效果怎样？
5 c8 Q7 Y! e8 y2 y" p. B  o谢谢大家！

arwen

没人顶吗？泪奔……自己顶一下

hanbing

回复 arwen 的帖子1 Y6 Q2 c+ v8 ~7 F

; S( M- c* d, C6 {% d  l这是脐带干细胞最原始的文献，诱导方法参考一下这篇文献吧！祝你好运！

hanbing

回复 arwen 的帖子  W( ?, z# U1 b2 F2 s

1 E3 h, q; i! E0 x( j& R2 f8 a参考这篇文献！

arwen

上面文献的方法是用化学抗氧化剂的方法进行诱导，已经有人讨论过了，这些东西对细胞有毒性，而且有人质疑这种配方并没有真正诱导神经分化，只是毒性作用使细胞骨架改变，看起来像神经细胞而已。