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我用的配方是DMEM培养基中加入10%的胎牛血清,0.05 U/mL 青霉素,0.05 mg/mL 链霉素,1mM的bd cAMP, 0.5mM的 IBMX, 25 ng/ml NGF, 2.5 μg/ml 胰岛素.但细胞死的很多,我用的是第2代的,对照组细胞长得很好。怀疑是诱导剂的问题,因为我之前用地塞米松、IBMX和胰岛素进行成脂诱导的时候,细胞也是死得很多,后来把低糖DMEM换成高糖的,细胞才存活下来,不过分化为脂肪细胞的还是很少。我想问题是不是出在IBMX和胰岛素上面?毕竟这两种成分都是相同的,可能是它们对细胞有毒性。是不是我换一种培养基比较好?
$ Y; J9 W* O9 [7 v" j" C% F( L此外,请问有谁用配方进行过诱导?BHA和DMSO这类化学配方对细胞也不好,而RA和NGF诱导的分化率比较低;EGF和bFGF能让细胞形成细胞球,处理起来比较麻烦。我看到国内有人用bFGF和N2联合诱导,分化率挺高的,不知道这里有没有人做过?效果怎样?7 d* S- T$ B; Q% H3 `7 X% y! x
谢谢大家! |
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