功夫不负有心人！晒下我传染的PP！和大家分享！

crystal

首先谢谢干细胞8号群的朋友，转染的过程一直给我远程讲解！

小伟-虎啸龙

这是瞬时转染的细胞吗？

siyue13

哈哈，C萨满的细胞哟

carolshen

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- F8 g( E, H* @' b) X+ e8 p& E* U3 e- t: O% ~5 l
这是神马细胞 可否说得详细一点 大家共享下 你的方法/ s5 _, |6 J( [2 A7 h$ U; g$ L
谢谢！

crystal

这是我转染的hela。
( |2 y& x8 `2 M; \' Y' F材料与方法：HELA细胞，6孔板，OPTI培养基，1640培养基，小牛血清，LIP2000转染试剂
& X/ N; a7 n5 T9 B! W+ b& z按每孔2*10的5次方加入HELA细胞悬液，含百分之十的小牛血清的1640培养基，当细胞达到90%左右，先PBS冲洗两次每孔，再加入OPTI培养基，2小时后开始转染，按照LIP2000的说明书，把DNA悬液和LIP悬液置5分钟后再汇合放置20分钟，再分别加入各孔，做好标记。5 e) n; T5 I5 [) p- k: v" V9 @0 g
本来说明书上是4-6小时后换含血清培养基，但因为我当时是6点半的时候开始换液，8点半做转染，但那天因为看帅哥去了误了些时间，等我转完的时候已经21：30PM，因为LIP有毒性，为了我的实验能成功，虽然很困，我还是磨磨蹭蹭的出去逛了一圈。
& H0 L+ x6 n) ?然后23：30的时候去接加班的老公，出去吃了烧烤，再缠着老公陪我去实验室，总之我就是在等时间，又不敢回家，怕回家去了，再出来似乎很困难！照理我应该凌晨1AM的时候换液，但看到不停打哈欠的老公，实在不忍心，24：30的时候就换液了！比说明书上的最少时间4小时我提前了半小时！当时都没报希望能成的！结果没想到昨天去拍照的时候，当看到荧光出现在电脑屏上的时候，心里那个兴奋啊，别提了，还是觉得挺开心的！