ips细胞几天换液好，培养30代需要多长时间，谢谢！

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jefferson 发表于 2011-3-7 10:06
& {, ]5 u" }* [& Q绝大多数都是每天换液, 跟ES培养条件相同. 也有几篇文献报道两天换液一次, 但是这种情况下, 每次换液时加的 ...

$ K! E8 J2 Z, V' u请教一下，传代初始细胞浓度多大为好？比如我有一支1000万细胞的冻存液，复苏后传代到几个T75或T25中，细胞密度会比较合适呢？

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回复 jefferson 的帖子6 w: e( h6 n* }. c# A' T1 i1 \
# ?' K2 z! @2 r
非常感谢。我养得是人的ips细胞

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回复 docqbzcn 的帖子1 a% Z+ `2 E4 [7 i# U
/ o3 |" X3 Z8 `% M/ p( Q% Y
胚胎干细胞全能性的鉴定主要包括以下几个方面：
. K* e5 N, I3 X# N: c9 h        碱性磷酸酶活性检测2 l# s! j/ j4 g# O  D8 a; m
        干细胞表面marker的免疫染色检测
' l$ i* i8 a7 a2 V# f- S$ _        干性因子的去甲基化分析
; {3 S1 F6 a( q9 {7 W$ h        干细胞内源基因的表达分析% `9 i& H. p5 T" m6 W* q/ N" ?
        端粒酶活性检测
8 `1 \9 g+ Y, O$ X* E8 }        核型检测% X' e) i+ i/ ^, Q1 s4 M( a0 d
        拟胚体形成
2 R4 K& T* |* ^1 _+ J3 ]        畸胎瘤形成实验8 Z4 Y/ k" S5 S, z0 V" b! q
至于表面Marker，人和鼠的ips是不同的，但是OCT4、SOX2、Nanog都是要检测的。人还要检测SSEA-3和4，TRA-1-81，TRA-1-60；鼠还要SSEA-15 E! v& w; ~$ k