关于慢病毒

wangyimei

       请教大家几个问题：1 C  t3 L" m9 ~6 u9 j/ z2 `$ J
1.首先是关于转染时间的确定：就是一直不清楚转染时间到底是怎么来算的，是从转染复合物加到细胞中开始计算，还是从转染后4-6小时换液后开始计算转染时间？
( f' x) @7 E, |7 t+ w0 O, l+ X6 J2. 做ips,慢病毒收集测定滴度后，含有oct4,sox2,lin28,nanog的四种病毒液体是不是一定要严格的按照1:1:1:1的比例来混合来转导被转导的细胞？病毒液混合之后用不用以含10%FBS的培养液稀释？
: b  T6 ~* B# q! Z# u# Z3.进行转导的时候，一般是转导多长时间再把含病毒的培养液弃掉，用连续进行转导吗

crystal

我觉得应该是从转染复合物加到细胞中开始计算吧！因为这个时候病毒已经被包裹了啊

841961279

首先关于第一个问题，我同意楼上的观点，其实转染过程中换液只是避免血清影响转染复合物的形成；其次，在转导细胞时我们一般都是按等量比混合后再加无血清的培液；转导时我们是一天后弃含病毒的培养液，然后连续转导3天。