转染的效率根本上还是由细胞种类决定的，有些细胞系好转，效率高，有些就不怎么好了。但是我们还是可以尽可能的提高转染效率，上面的战友讲过，细胞生长状态要好，这个很重要。另外，每种细胞系都有自己的最好用的转染试剂，要多看文献知道这种细胞系用哪种转染试剂最多。然后自己可以按照DNA和转染试剂的比例做个曲线，看看reporter的表达效率，做到最好的转染效率。其实DNA的质量也很重要，不仅仅是内毒素影响细胞的生存，一般情况下DNA超螺旋最好比列越高越好。为了促进表达，转染前线性化也可以（可能是这样，没有这么做过）。0 o* ?% b x" {: g
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如果有些细胞系确实难转，就应该考虑其他方法了，电穿，病毒之类的。amaxa的nucleofector可以直接把质粒打到核里，很好用。+ i% @0 q6 M+ G
发表于 2011-4-2 13:50
