发育毒性的体外干细胞试验方法的改进：在胚胎干细胞试验中使用分子终点

mominglily

题名：Improvement of an in vitro stem cell assay for developmental toxicity: the use of molecular endpoints in the embryonic stem cell test
3 J& E1 n5 d" C' W$ g# W! @9 k- q) w: j          发育毒性的体外干细胞试验方法的改进：在胚胎干细胞试验中使用分子终点
9 l  C1 x# Q! [7 Q6 f/ U, I作者：Andrea Seiler∗, Anke Visan, Roland Buesen, Elke Genschow, Horst Spielmann
; v4 |) O2 j' w2 Y: E. o摘要：胚胎干细胞试验（EST）试验利用鼠胚胎干细胞体外分化的潜能来测定体外胚胎毒性。EST代表了一种根据化合物的致畸潜力划分化合物毒性等级的可靠的，经科学验证的体外体系，该体系是以胚胎体（EB）集落中跳动的心肌细胞的形态学分析和未分化的鼠胚胎干细胞及分化的3T3成纤维母细胞的细胞毒性作用为基础的。为了鉴定除了显微评价跳动区域之外更多客观的分化终点并将EST试验应用于高通量筛选系统中，我们通过建立分化的分子终点改进及扩展了EST试验方法。2 s4 g& p+ r6 i9 s! P/ g. W
采用细胞内流式细胞技术研究在受试化合物的影响下肌球重链蛋白（MHC）和α-辅肌动蛋白基因的定量表达情况。此外，定量FACS（荧光激活细胞分选技术）分析作为常规的终点对于化学物质的分级表现出了相同的灵敏性，然而却显著缩短了检测周期。在7天内，观测到了肌节标记基因的最大表达。我们的发现表明肌节的结构蛋白--α-辅肌动蛋白和重链肌球蛋白（MHC），看来是由体外数据预测体内发育毒性的最有前景的候选标志物。因此，改进后的EST试验有希望作为关于使用干细胞技术及基因表达分析领域的技术进步对发育毒性风险评估的新的预测筛选方法。
) Y8 x$ D, [8 _[ Reproductive Toxicology 18 (2004) 231–240 ]1 [" e8 ]6 n: G6 P2 S- a

mominglily

回复 tpwang 的帖子
6 E9 l" e% \/ S8 s; F/ g3 q4 W; c. W% N' z) J  ]
嗯，您的建议很好，受教了，谢谢！