神经球冻存-DMSO

angelyannan

请问大家冻存神经球用的DMSO是哪个公司的？我想冻存C57小鼠的神经球。的我知道sigma的三个货号，D2438，,D2650，,D5879.可是不知道选哪个。有谁用过哪一种比较好。请分享经验，谢谢。

xuanxuan69

我们用的是sigma D2650,细胞复苏后长的都很好，不过细胞来源不同，还是只能作为参考

angelyannan

回复 xuanxuan69 的帖子* v5 |1 A! Q/ P8 n  e  a. s. p

0 ~4 C& ]# w: c0 s/ D* c0 f我已经在用了，选的是d2650，就是还没有复苏呢，谢谢啦

yinjiqingqq

请问，楼上的，神经球冻存需要分散为单细胞吗？冻存密度如何？有详细的Protocol 吗？

angelyannan

回复 yinjiqingqq 的帖子8 l7 V: N& ?  \+ Z0 `

6 O- {2 Q. q4 }( k7 m0 E4 P, |3 j我的冻存技术还不成熟，不过请教过经验丰富的老师，神经球冻存最好不要分散成单细胞，因为这样会造成不同程度的机械损伤。一般25cm*2的培养瓶冻存两管，每管冻存培养液为0.5ml。) V( \6 U9 f# K& z; j
我复苏过一次，个人感觉复苏率还可以。但是传代后细胞死亡较多。所以还得摸索。希望以后多多交流。

yinjiqingqq

回复 angelyannan 的帖子- w: S# P( ?& i0 \9 M% ?5 ]' V( v

- j; F7 C: E/ S非常感谢！我看一些论坛上说冻存加血清，但是平时培养的时候是不加血清的啊？

jessewill

回复 angelyannan 的帖子
% Z: B* M. D# P( H, d# K& b
# a$ |& B) p+ e: r你现在冻存的培养基是怎么配的？不要将neurosphere吹散吗？复苏效率如何

dianying

回复 angelyannan 的帖子
4 |5 \/ J, \$ r' y3 a1 X. [  x
2 ^4 a- c( q* i- l; }" O我用的是sigma 的D2650-5X5ML，用在c57bl/6 和人上都很好用。大瓶的不好，容易污染。2 t/ q2 \. k% d+ X) j# l

jessewill

回复 dianying 的帖子! h* R8 H6 M1 C$ f- ?0 f- S
7 b  m# @, l, ?
你现在冻存的培养基是怎么配的？不要将neurosphere吹散吗？复苏效率如何

dianying

回复 jessewill 的帖子
$ D$ u+ J3 h3 d8 P1 U% ]+ ]  D! |3 W8 F+ o) I
冻存液就是你平时的培养液加10%DMSO, 复苏率没有准确地拿计数器数过，但是每次化冻后我需要的种的数量（2x10的5次方）足够。