关于质粒转入细菌实验设计（诚心诚心相求）鸟枪法

jun8013

那么大片段连T载体的确比较难，但是也能成功，只是感觉效率相对较低，不知道你是按照怎么比例做连接的，目的片段与载体几比几，看你的到产品很少，建议挺高目的片段的比例
' g: {+ X* }) m1 e" Z7 ?1 s/ [你为什么不用快速酶呢，30h酶切。。。。。可以用fermentas的快速酶，不到1h就ok了，而且大部分酶的buffer都通用。如果感觉效率还不高，就分步酶切，没必要割胶回收的，直接用PCR产物纯化试剂盒就可以回收到你的片段，而且回收率很高，胶回收会损失很多的。

jun8013

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8 l4 ]( }' T+ S8 `这个恐怕就不可以了。。。。。。。。。这个只能割胶了。。。

jun8013

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我也帮你找找看有没有大的克隆载体，大的表达载体到是有，就是不知道他的拷贝数会怎么样，个人认为i你的比例有点低了，一般是3:1到7:1

jun8013

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