干细胞传代中的问题

rongrong

在干细胞传代中是吹散开好还是不吹散好？吹散开或者不吹散那种情况会导致分化啊？？

sarah19860420

回复 jefferson 的帖子
1 w; X+ d/ A8 ]0 O6 @6 r- B/ V- E3 `2 V+ f! }: T" n
想问下什么样的团块是过大的呢，我消化HIPS的时候，发现镜下看起来的克隆团，24h后都不贴壁。

sarah19860420

回复 michaelgibh 的帖子
" {8 k5 p9 p; s3 R; T8 m
, k0 z7 I* q  \* f那是不是用matrigel培养，就必须用mTeSR培养液呢，在KO-DMEM-F12中另外加bFGF不可以吗

sarah19860420

回复 michaelgibh 的帖子9 |% g9 k; O" I/ f
, ^1 w, c, }7 z
我想问下你们培养的IPS细胞是在feeder上培养的，还是matrigel呢，是不是在matrigel上培养就要用你们这种培养液呢。我们之前一直用的都是KO-DMEM-F12，这两个培养液对细胞贴壁有什么影响吗，因为我最近用的KO-DEME-F12传细胞，结果小克隆在matrigel上不贴壁？不知道是为什么

YLL824WAN

回复 michaelgibh 的帖子$ r" z9 t' W( Q1 C% E
. F! a% K. X; O; _& v3 d
谢谢啊！好人……真是帮大忙了，感激不尽哦！呵呵

michaelgibh

回复 YLL824WAN 的帖子
+ p! R# L9 w& I
$ _- O4 B5 |3 }; ^: H  V3 z所需要的生长因子全部由mTeSR来提供，metrigel只是用来帮助它贴壁的。这是世界上应用最广泛有效的培养方法。我们用这个培养的很好。stem cell 公司已经推出mTeSR2，与mTeSR1一样也是defined，只是不含动物蛋白，将来若ips用于临床还需这种培养基。

YLL824WAN

回复 michaelgibh 的帖子4 j7 S4 s) v9 G' }& H
1 O, |8 T3 e4 n9 Z8 M* G2 i
但是iPS生长不是需要MEF释放一些生长因子吗？不用MEF的话，metrigel可以满足吗？你们的iPS状态怎么样？会不会有影响呢？

michaelgibh

恩 对 是配套的 不用饲养层培养 用metrigel即可 需要单独买的 至于具体信息 可以去stem cell 公司网站上去查 我也不知道多少钱 我们实验组有人专门负责订购试剂

YLL824WAN

回复 michaelgibh 的帖子
% k* Q5 d/ I- }! v( y8 D2 J* A
% Z' J" _- T9 z% ]/ y/ X你好！我也是刚刚订了mTeSR的培养基，还打算做MEF饲养层呢！请问一下，这个培养基是不用MEF饲养层的吗？那个metrigel是不是跟培养基配套的？还是要单独买呀？多少钱？谢谢指点哦！

sarah19860420

回复 michaelgibh 的帖子4 G) q' L; B5 b, m

/ @0 e% @% s! c: Q哦，原来如此