请问，如果想知道一种microRNA是否对某种蛋白表达有升高或降低作用，应该怎么检测呐

临床干细胞

/ ?  h3 R: u3 }
: i( Y6 ]) Q% N& K2 e老师给我了个新课题，现在想知道某种microRNA是否对某种蛋白在肾脏中的表达降低有作用，应该用什么方法来验证呐？小弟初次做microRNA，哪位高手给些意见，我应该怎么做呐

cjhpumc

需要利用双荧光素酶报告系统，把该蛋白的3' UTR区的表达克隆与你要研究的miRNA 表达克隆共转染后，通过对荧光的定量检测来验证两者是否有一个相互调节的作用

linlicau

回复 临床干细胞 的帖子: d) F" H" P, a2 O4 P
3 r8 `6 [' I. t3 r1 j  e
沙发回答基本正确。具体设计你可以参照某些paper中的设计，其实不难。

mckf111

除了2楼所言 还应补上定量PCR和Western

临床干细胞

感谢楼上三位啊，我们论坛真是藏龙卧虎啊

runsong

如果想再深入的话，可以做免疫共沉淀，找到直接作用位点。