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MSCs向骨细胞分化:( R: }, ]9 Q2 u! B3 T6 \5 u
使MSCs向骨组织分化的经典方法是用抗坏
# D* X7 |) c0 q: m血酸、β-磷酸甘油、地塞米松孵育汇合生长) N7 f7 C4 @7 x+ ?3 y& }* e
的单层MSCs细胞2-3周。这些MSCs形成集
* d) t* c& M6 q* I, \& z6 K! W- f: b落且碱性磷酸酶表达升高,随着时间延长发- i8 j; a4 O9 U. c
生钙蓄积,茜红素染色阳性。
6 Q5 G7 A; [: T6 p+ S* D* z' g0 c: V& _1 ]
MSCs向脂肪细胞分化:
( N% ?6 O$ u( A" UMSCs培养与地塞米松、胰岛素、吲哚美4 A+ L" z' J! I0 D& q8 }& U
辛、异丁基-甲基黄嘌呤孵育可诱导向脂肪细' V/ x# L. |' C& Z4 H) | l' e7 C
胞分化。在细胞内脂肪泡积累,并且表达$ s6 a6 S9 p! y( N2 t- r6 C0 g9 V- W
过氧化物酶体增殖-活化受体γ2、脂蛋白酶
; W+ c, ]: @ i s k' d和脂肪酸结合蛋白aP2。最终脂肪泡融合并且; T+ G8 l* c5 X1 ?. V& t, I
填满细胞,可用油红染色检测。) ?* Z' v1 H! j( p5 Q% B; ?
( O3 }4 P' X4 \& pMSCs向肌细胞分化:9 t3 C' _; J8 w2 B$ c: ~5 h7 l" L
1982年Taylor and Jones首先报道了
: O8 A: q: c; I/ g5-Azacytidine 诱导MSCs向胚胎和成年肌细& R6 U" x6 l5 C+ q
胞分化;
}# g/ f) F# ^8 j4 O: r1999年Phinney指出两性霉素B作用于小鼠
( O) Q7 t# |4 |6 M+ hMSCs可以导致类似肌管的多核肌纤维的形. t3 I- Z; U2 _; C2 Q7 g& q
成,并产生节律收缩性。
% @2 `+ D9 g* b. ~! w
& E; p5 M' V5 H/ a# z0 D( u# P, kMSCs向神经样细胞分化:
' w9 T+ ^8 Y0 j P小鼠MSCs来源的成骨细胞和MSCs自身在
$ `1 d3 h" a' `3 {, C7 e神经生长因子和5-氮胞苷的作用下会成为神+ ]" {0 B8 D8 o" Q$ T
经细胞形态表达成熟神经元的特异性标志。& l* S5 q) q; L0 Z* c, i
这些神经样细胞缺乏产生动作电位的电压门- R8 F4 H" L7 _. w) {: ]5 P# t
控离子通道,因此不能称作真正意义上的神9 J: ~0 D7 d- t( H* S
经元。
! W j8 ^0 [7 `6 N8 F3 k9 Q5 Z6 ]7 n' O G% H0 d: x
MSCs向软骨细胞分化: V; c+ q& K' `' P
MSCs向软骨细胞分化需要以下条件:三% O3 x$ ?6 b* p0 C7 S8 @
维培养模式,无血清营养培养基,加入6 a- @) N3 D8 N$ J7 b% Z
TGF-β成分。) @% V5 I+ s, o5 s3 a- ?
当这些条件都具备时,MSCs会丧失其成
! H( [0 {7 R5 j( ^5 q/ [纤维样形态而开始表达大量软骨特异性胞外
* ^$ Z# J G E- k成分,包括大量的糖胺聚糖生物合成,伴随
: J/ `1 O P4 @# m) _3 S细胞形态的明显改变。5 _$ e4 j2 {& z2 E) R: n' h
) R3 g' e$ z* ~ M5 d1 _0 x! j. l) A |
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