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[请教] 如果细胞一直长着不传代会怎么样   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-7 02:53 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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我按文献上所说,培养成体间充质干细胞,可是四五天左右已经长得很满了,但文献上写得是要培养四到六个星期,老师的建议是这可能不是干细胞,要我每天换液,让它长到四五周的时候,别的细胞都死了,就剩干细胞的时候再考虑传代,不过现在细胞实在是太满了,这样下去对细胞不会有影响吗
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17楼
发表于 2011-4-8 07:47 |只看该作者
jj2570782 发表于 2011-4-7 14:00
9 E6 Q# A3 M2 E4 l8 l请问光风兄,您具体是怎么控制胰酶消化时间的呢?是不是MSC贴壁没有成纤维细胞贴壁那么牢固呢?我也在养r ...

: l5 J+ y7 J* N  L2 @. B9 _# T6 u) KMSC我的感觉贴壁还是比较牢的,一般是等到80%时才传代,你看是不是生长因子有些问题还是长的时间不够
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16楼
发表于 2011-4-8 07:46 |只看该作者
谢谢各位的解答,我按自己的经验也是应该传代了,可看全文没有提到passage的字样,而且说了是四到六周后其它细胞都死光了,只剩下比较单一的胞型的细胞,我的老师也不太懂,他认为应该直接养
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15楼
发表于 2011-4-7 18:30 |只看该作者
天啊,居然还有人这样养细胞。赶紧把你的细胞重新用酶消化起来,重新利用差异贴壁的方法分离,纯化,然后诱导分化试一下,如果分化不了的话,我建议你重新开始原代培养吧。
7 ~# n. I2 b0 N; r4 e另外,不知道你看的什么文献,如果是中文的我建议你不要全盘照做,还是多看看英文的分数较高的文献。
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专家 优秀会员 金话筒

14楼
发表于 2011-4-7 17:47 |只看该作者
恕我直言,这种思路不是很对。死细胞会对活细胞有很大的影响,所以要尽量去除死细胞。另外,细胞长期不传代的话会凋亡或者发生不可逆的损伤。所以分离干细胞关键要纯化。其实话又说回来,如果有少量一同分离的细胞可能对干细胞的生长有支持作用。但不论如何肯定要传代的。
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13楼
发表于 2011-4-7 16:21 |只看该作者
还没见过细胞养4到6周的呢,一般间充质培养3-5天就可以传代了,不然细胞就没有空间继续伸展了,而且间充质细胞可以传很多代,这样就一步步的纯化了,多看点相关文献,学习别人的纯化方法。
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12楼
发表于 2011-4-7 14:00 |只看该作者
光风霁月 发表于 2011-4-7 10:18 3 }" P( L5 H6 q( m8 @/ C
间充质干细胞可以经过贴壁分离方法逐步纯化。原代中混有杂质细胞比较多,所以你的培养中细胞比较多,一部分 ...
" l, C% a( p0 _
请问光风兄,您具体是怎么控制胰酶消化时间的呢?是不是MSC贴壁没有成纤维细胞贴壁那么牢固呢?我也在养rBM-MSC,现在很纠结怎么纯化!望能指导指导小弟!
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11楼
发表于 2011-4-7 13:56 |只看该作者
皮搋子 发表于 2011-4-7 08:50
8 F9 O3 p9 B9 v6 G这种等着其他细胞死掉而留下干细胞的情况是几乎不可能发生的。
7 E1 e2 Q/ U3 Z* f! R( B7 H; s
; }9 n# w) D. X4 X) v首先,你的细胞到底是不是干细胞不能通过 ...

7 T# N( p# P/ R1 _弱弱的问句,我也养的MSC,怎么分层啊?

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金话筒 优秀会员

10楼
发表于 2011-4-7 12:06 |只看该作者
感谢各位朋友的解答,让我学习了不少,谢谢

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金话筒 优秀会员

9楼
发表于 2011-4-7 11:58 |只看该作者
呵呵,会发生生老病死的结果。精练的总结!
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