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本帖最后由 细胞海洋 于 2011-4-7 10:05 编辑
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作者:李云剑 林樾 燕辛 周宏礽 6 \+ D3 S" ?1 J1 a, ~
谭谦南京医科大学鼓楼临床医学院整形烧伤外科
0 D, }* {' p7 |; D! W6 O 《现代生物医学进展》2010年20期
) Q( x0 t6 [. P# B1 {8 H 摘 要:目的：比较不同血清浓度培养体系对表皮干细胞增殖分化的影响。方法：采用两步酶消化法和Ⅳ型胶原差速贴壁相结合的方法获得人原代表皮干细胞,分别以0%、5%、10%、15%和20%血清浓度的培养基在96孔板中进行培养。观察表皮干细胞形态,克隆形成及增殖的情况,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组细胞存活和生长情况,分析量效和时效关系;持续传代培养细胞,每次传代的同时取适量细胞,用免疫细胞化学的方法进行表皮干细胞和表皮细胞相应标志物（K19、K14和K10）的测定。结果：表皮干细胞在各种血清浓度的培养基内均能形成克隆,增殖良好。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定,所得相同时间点各组OD值在统计学上没有差异（P〉0.05）,表皮干细胞生长速度各组间无差异。第1代表皮干细胞K19均有表达,而K14和K10表达均为阴性;其后高血清浓度（15%、20%）培养基中细胞较低血清浓度（0%、5%）先出现K14、K10蛋白的表达;培养至第10代是各组细胞均出现K10高表达,而K19、K14表达阴性。结论：在低血清浓度（0%、5%）的培养基中表皮干细胞生长良好,且能够相对较好保持表皮干细胞的特性。[著者文摘]% ~4 J7 k. a$ G* l5 U, P6 H# z p
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发表于 2011-4-7 09:49
