我提取的DNA的吸光度比值大于2.4是怎么回事？

TSENG

我提取的细胞基因组DNA的吸光度比值大于2.4是怎么回事？有时还能达到2.7以及3以上。求各位给分析一下，谢谢了。是用试剂盒提取的
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guitaoips

请问：
! D) v0 I+ V  k  X. h1）你使用的分光光度计，在测量标准样品的时候是否有误差，你最好试一下，以鉴别是否和仪器有关。如果没有误差，请核实你操作分光光度计是否标准，比如操作顺序、你使用的校正液是否是你洗脱基因组的溶液。: J: z  ?' V% {' j5 Y9 X0 H+ @! k
2）你提取基因组的试剂盒是试剂中是否加入有效的RNA酶。

jiaqing

DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收，其吸收峰在260nm处。波长为260nm时，DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关，也随构型而有差异。
7 j! [3 `) y+ O! L7 N
  T+ p, M# v. @3 f: \9 z对标准样品来说，浓度为1μg / ml时，DNA钠盐的OD260＝0.022 n# [% F  G0 w6 z: R/ E, Z: j6 k9 D
) E: f# v1 [5 ^+ i& |$ g* X* T, d
当OD260＝1时，dsDNA浓度约为50μg / ml
, {  n( \) P, ^4 b6 R( T' B2 y) v/ \' X) ]
               ssDNA浓度约为37μg / ml8 M, [5 {$ `! p3 f

# D* f# v. X- n/ o9 E' h               RNA浓度约为40μg / ml
* g6 h  R1 j" n6 ?% F" l6 d1 L/ a; J6 r) j8 M6 y7 k. M6 u! z' R
               寡核苷酸浓度约为30μg / ml（youyu底物不同有差异）
! p$ w0 k! L0 b4 f( H6 h, b% |* T0 }* e6 p6 o
当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时，会影响DNA吸光度的准确测定。一般情况下同时检测同一样品的OD260、OD280和OD230，计算其比值来衡量样品的纯度。
  |/ K& g, D: N    经验值：
/ B) L0 y( S2 V# `; h5 ]2 k% S9 E; Y0 P0 N) M( i, t1 K
纯DNA：OD260/OD280≈1.8(＞1.9,表明有RNA污染；＜1。6，表明有蛋白质、酚等污染）
/ Y& k. F6 |3 f1 y2 w: `+ Y3 G5 j0 @6 h0 w8 O3 M
纯RNA：1.7 ＜OD260/OD280＜2.0（＜1.7时表明有蛋白质或酚污染；＞2.0时表明可能有异硫氰酸残存）