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标题: 冻存造血干细胞 [打印本页]

作者: huhuihua1025 时间: 2011-4-11 08:05 标题: 冻存造血干细胞

最近要自己冻存造血干细胞，请教干细胞冻存剂有什么好的选择，看了一下，用得比较多的都是日本的冻存剂，但是要病人外购，我又怕担风险，最好是能通过医院正式买到的。好像有上海三生生物科技生产的，不知效果如何，请赐教！

作者: 临床干细胞 时间: 2011-4-11 10:16

FBS与DMSO9：1比例不行吗

作者: 道培干细胞库 时间: 2011-4-11 11:55

不是用液氮储存吗？-196度以下的~在脐血库储存的？我家的就是武汉道培干细胞库呀！

作者: wang66 时间: 2011-4-11 21:13

细胞最终是冻存在液氮，但是也要添加冻存液的···

作者: huhuihua1025 时间: 2011-4-12 08:25

保护液选用上海三生生物技术有限公司生产的造血干细胞冷冻保护液。在冰水浴中将低温保护剂压入外周血干细胞采集袋中，同时摇动采集袋，使低温保护剂、干细胞充分混匀。低温保护液加入量为重量比4∶1，即4份低温保护剂加入到1份外周血采集袋中。将混匀后的低温保护剂和干细胞混合液装入到100ml医用低温塑料袋中，每袋装入量不超过70g，封口后立即放入-80℃冰箱。尽量缩短操作时间，减少干细胞的损失。留样冻存，以备还输时检查。1.6 复苏回输冻存的PBSC悬液迅速放入40℃恒温水浴中，1～2min内融化，迅速回输

作者: cncpht 时间: 2011-9-25 02:58

听说DMSO这个东西国内好像没批过临床可以用，现在大都是用进口试剂。国产可能也行，但临床级就不敢用了。

作者: doctor009 时间: 2011-10-21 22:55

我们是三上海三生公司的，医院没有办法购买，都是患者自行外购的，我们用不少，效果不错！

作者: joesiezhao 时间: 2011-10-28 13:20

直接去脐血库存就行了，DMSO和低分子右糖，进口冰冻袋，安全性没问题。

作者: baicaikua 时间: 2012-1-18 16:21

防冻液是 DMSO和右旋糖酐1：1配置成的，加入防冻液的时候要在4℃以下，防止DMSO对细胞有毒害作用，然后程控降温到-80℃，转入液氮罐被保存，通常认可的是保存22年。

作者: xydl 时间: 2012-3-27 05:44

厚度不要超过1厘米最好放入冷冻夹内。

作者: mayanfeng 时间: 2012-5-1 07:08

DMSO跟右酐1比1并且DMSO不能超过总体积的百分之10

作者: 帝国黑骑士 时间: 2012-6-11 17:17

冻存液的话采用血清：DMSO =9:1提前配，放到4度。冻存的话，采用冻存袋，再将冻存袋放到冻存夹内。在经过程序降温冷冻就可以了。

作者: jjjddf 时间: 2012-9-18 13:38

DMSO和右旋糖酐

作者: Donnies 时间: 2012-10-23 11:08

一般都是用DMSO，血清和细胞培养三者俺1:3:6进行冻存，但是如果纯血清也可以啊，DMSO国产的都可以啊

作者: xueyuanqingfeng 时间: 2012-10-25 10:29

去脐血库存储就好了，要使自己做的话，费时间，还要专业的仪器，还要学冷冻的知识，很麻烦。患者存外周的动员血的话，直接采血，放到脐血库去处理就行，他们有专业的人员设备，程控降温仪，而且都有相关的资质，总比自己担风险强。

作者: zhuhaoyao 时间: 2012-11-13 09:33

本帖最后由 zhuhaoyao 于 2012-11-13 10:02 编辑

分别采用细胞外和细胞内两种冷冻保护剂，细胞外为右旋糖酐，细胞内为DMSO，DMSO浓度为9.8%，两者比大约1:1，然后程序降温至-95度，投入液氮保存

作者: cantonchn 时间: 2013-3-29 09:25

武汉道培库是违规收集脐带血吧！~~~

作者: 孙帅帅 时间: 2013-4-22 11:55

回复 baicaikua 的帖子5 a5 A8 k" {: H; U! w

你好你们做过脐血单个核细胞冻存吗？你们的冻存效果好吗？谢谢~~

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