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[请教] 一个关于胰酶的简单问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-11 21:23 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
胰蛋白酶是酸性蛋白质还是碱性蛋白质,溶于水中后,ph显酸性还是显碱性?
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沙发
发表于 2011-4-11 21:58 |只看该作者
前段时间看到又说最佳工作pH在8.0左右!不知对楼主是否有用!
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藤椅
发表于 2011-4-12 09:11 |只看该作者
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6 r' k/ Y: r/ b( F- ], E, z6 n. e# B. `
没错,最佳工作PH是8.0,超过9会发生不可逆失活。查到胰酶是200多个氨基酸组成,所以想知道它自身的酸碱度
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板凳
发表于 2011-4-12 10:51 |只看该作者
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怎么判断蛋白酶是酸性中性还是碱性?/ I! k+ H7 l& o" j) Q+ m# m' t
按其反应的最适pH值,分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。催化蛋白质水解的酶类。种类很多,重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。蛋白酶对所作用的反应底物有严格的选择性,一种蛋白酶仅能作用于蛋白质分子中一定的肽键,如胰蛋白酶催化水解碱性氨基酸所形成的肽键。
! t8 a# B- K  B: Q5 d6 ^. l& V综上所述,胰蛋白酶最适工作PH是8.0,应该属于碱性蛋白质。
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报纸
发表于 2011-4-12 11:03 |只看该作者
胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃ 时,胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。   1. 称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。搅拌混匀,置于 4℃ 内过夜。
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