请教如何将细胞克隆/集落从饲养层细胞上分离下来

dove365cn

如题，很多人都用玻璃管拉细后挑取，也有的人用什么环套住然后消化，请问各位有经验的老师，具体该怎样操作，十分感谢

lena67

我们是直接用10uL的枪头，显微镜下围绕克隆划个圈或划个“井”字，然后一边小心推动克隆一边用枪头吸取，多练习几次就好了。

sdjjfangfang

我们使用的也是拉针对方法，然后可以用枪头将分割并剥离下的细胞直接吸走，转移到新的孔板中。或者是直接用一个胶皮管与玻璃管相连接，把细胞吸入到玻璃管中，但注意不要吸入到胶皮管中。

dove365cn

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那显微镜是不要搬到超净台里啊，

dove365cn

回复 sdjjfangfang 的帖子) L9 I* G! {/ L7 J" `
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迷惑的是，这些都需要在镜下操作吧，还是直接肉眼观察。肉眼看的话只能看见一小点，有点笨，大家莫笑话啊

cony

我们用玻璃管拉细后挑，显微镜放超净台，碰一下克隆就脱了，然后吸走。。

yangpan521

将玻璃针拉成弯头的，这样容易吸取，只要将实验室照一下紫外就行，不需要将显微镜搬进台里，吸时管里要先吸入一点培养液，这样容易观察是否将克隆吹下

st_oliver

不知道是我没看懂还是怎的，你的克隆用胶原酶消化不下来吗？还是，如果是已经建系了的细胞，胶原酶消化，然后胰酶消化就可以传代了，要是是要建系的，挑取单克隆，就如同上述大家说的，我也是先用针刮下来，然后我吸管吸取，再用胰酶消化喽。熟能生巧！