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碱性磷酸酶的部位讨论? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-13 23:29 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
        小弟是做骨髓间充质干细胞的,通过实验观察和文献阅读,目前有一个疑问,碱性磷酸酶钙钴法染色成骨诱导后的细胞,有几个问题:1:那么碱性磷酸酶是在细胞浆,还是在细胞膜,还是在细胞核附近:2:我们染色的碱性磷酸酶是那种类型。/ B8 G% Q1 I$ s1 }8 L$ Y
理由:( ?' B% |! K2 _4 u6 `% C( M! Y) \
1:碱性磷酸酶有4种类型,包括组织非特异型,胎盘型,肠型和生殖细胞型。非特异型沉积在细胞膜上。(Orimo H. The mechanism of mineralization and the role of alkaline phosphatase in health and disease[J]. J Nippon Med Sch, 2010,77(1):4-12.)
$ O! Z4 G6 N& b6 |2:碱性磷酸酶沉积在细胞核附近。(王洪复. 骨细胞图谱与骨细胞体外培养技术[M]. 2001.60-61.)
; {$ s9 o' |3 K3:碱性磷酸酶沉积在细胞浆。这个是我个人实验观察。7 N1 Z1 g/ B7 G& C
请高手知道迷津。非常感谢!3 p1 P- F  B5 W. h2 X) |
小弟QQ252067350;email:kqyyls@163.com
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沙发
发表于 2011-4-14 15:08 |只看该作者
回复 kqyy 的帖子7 N% [( `9 o; p  c1 d
  I* U) _. H: f( J, h$ J6 h) @+ s
我个人猜测,会不会是不固定的在细胞内呢?我也要做成骨诱导,目前还没到这一步呢!因为在细胞信号转导过程中,有些酶是经常可以发生translocation的。比如说像protein kinase C. 有时候是在胞浆里,但是在一些信号转导过程中会进到细胞核内。而且,成骨细胞的碱性磷酸酶还是分泌蛋白要经过高尔基体的包装转运。所以即使在胞浆内位置也有可能发生变化。不知我的猜测对不对,你还可参阅一些文献。如果有确定的说法,还望能分享分享!
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藤椅
发表于 2011-4-15 11:16 |只看该作者
谢谢你的提醒,我是想找本关于酶学的书看看,但是一直找不到。因此,我没有办法证实,如果你有证实,请联系我(kqyyls@163.com或者QQ:252067350)

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板凳
发表于 2011-4-20 11:49 |只看该作者
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很关注此问题,组织非特异性ALP是在细胞膜上,Abcam的抗体说明上也是在细胞膜。% L- {: S# Q+ W! `! o
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报纸
发表于 2011-4-20 14:56 |只看该作者
搜到几篇有碱性磷酸酶的免疫荧光标记实验数据的文献,发现碱性磷酸酶在细胞内还是在胞浆中。
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地板
发表于 2011-4-20 22:01 |只看该作者
我实验室一直做骨形态的染色和骨髓间充质干细胞的染色,在骨髓间充质干细胞一直都观察到的都是胞浆表达!
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发表于 2011-4-20 22:33 |只看该作者
可否给小弟传点资料,学习下!

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发表于 2011-4-22 14:01 |只看该作者
没问题,怎么传给你?

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发表于 2011-4-24 00:44 |只看该作者
kqyyls@163.com;QQ:252067350

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发表于 2011-7-13 10:43 |只看该作者
回复 繁星932 的帖子
: l7 T2 |* h8 F+ ]
+ R* u+ a  E. g# y1 X% o2 s你好我做成骨细胞染色最后颜色总是黄黄的  是什么原因呢?希望高手的你能给指点指点  万分感谢
( J- E, F. R: K. D" k
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