转贴：PNAS:科学家发现肿瘤干细胞的一种新来源

shen_coco

网上找不到原文啊，4月11在线出版了吗？

shen_coco

刚拜读了一下这篇文章，确实有点意思

shen_coco

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: v, x0 j$ T- ?. D# I# Y3 d# R 写的很好，其实我看完这几篇文章，还是有几个小小的疑问，大家一起来探讨：第一，为什么在培养乳腺上皮细胞时，那些CD44LO细胞会漂浮？难道是因为它转化为干细胞的过程中需要悬浮这种特定的条件，可是后来分离出来的漂浮细胞也是贴壁培养的啊？( o; _$ p+ C, M$ ~. ^' H4 f- t5 P
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第二：那些漂浮的CD44lo细胞与贴壁的CD44lo细胞之间有何不同，作者做过实验，一开始贴壁的CD44lo细胞不能转化为干细胞，这两者细胞之间基因有啥不同，还是蛋白水平有差别。作者没有进一步研究。# ]; Z. h& U, K( I! c6 `* z& c
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第三，作者养的上皮细胞是用MEGM培养基，全称是Mammary Epithelial Cell Medium，我不知道这种培养基有没有含血清啊（我推测MEGM应该是不含血清的），我也没养过HME细胞，有没有谁能告诉我，用MEGM养HME时，有多少细胞是悬浮的。如果换用含血清的DMEM或者其他培养基养，还有没有细胞漂浮呢。1 m0 |# T  Y7 e0 |# r
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第四，作者用2D培养的时候，干细胞不会分化，3D培养的时候，干细胞出现分化，这是为什么呢？3D培养具体是怎么做的（原谅我文献看的少！！），3D和2D培养的最大区别在哪里？如果用2D培养，再加点血清是不是也可以诱导干细胞分化呢。
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暂时想到这些，在仔细研读下这篇文章，确实很有意思，虽然文章篇幅不多，但内容很丰富，可以遐想的有很多，可以锻炼发散思维，哈哈$ I) O1 _5 l( w  x5 p4 w: M& D

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shen_coco

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贴壁的细胞里面，HME CD44loCD24+ cells were ～51% ESA+ and 49% ESA− cells，有49%也是ESA阴性的啊，为什么这些细胞没有漂浮，也没有转化为干细胞的能力呢，可见最开始漂浮的ESA-细胞，与贴壁的ESA-细胞有本质的区别，作者没有深入研究。" n/ T, R8 e& K5 x
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我知道3D培养是啥意思，就是想知道具体是怎么操作的
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为什么我会提到血清呢，因为在养肿瘤干细胞的时候，一点血清都不能加，如果中和胰酶的时候加了血清，就算洗的很干净，也会促进干细胞贴壁和分化。我觉得作者用的MEGM肯定是不含血清的，我推测MEGM养乳腺上皮细胞的时候，应该有很多悬浮细胞，不然作者应该不会特意去研究这些细胞的

shen_coco

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MEGM是不含血清的，为什么那些细胞会自己悬浮，分选出来后又会自己贴壁呢

shen_coco

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2 ^1 r  Y% O! p& U: }$ JATCC上的图片上看，没有很多悬浮的细胞啊

shen_coco

回复 tpwang 的帖子7 ]% _% u" ]1 L+ @: E
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确实，文章有点不严谨，但是作者对原代的细胞是直接上流式筛选的，而且成功了。