关于间充质干细胞传代过程中干性维持的问题

zhangl

请教各位大侠，MSC培养过程中干性维持需要什么条件？

zhangxf0928

我也想知道，同问

kqyy

培养条件好的情况下有报道可以穿到7代，可是我自己养的最多4代。至于说无限传代，我不大相信，可能是在体内的情况下。有报道表明，培养基加入生长因子，可以保持细胞的干性，但是代价高。

飞翔的十字架

我觉得主要是传代过程中的各种刺激因素导致干细胞干性的变化，如胰酶的刺激，吹打时的力学刺激，ECM的变化等等。所以传代要注意消化时间和胰酶浓度，注意吹打的技术操作，还有可以添加一些因子如EGF bFGF等

alioli

我认为干细胞的干性应该是指自我复制和多向分化的能力吧。自我复制的话主要表现在传代过程中细胞增殖能力强，或者更具体一些具有克隆形成能力，这就要求细胞培养的条件适合于细胞的生长，文献里MSC基本都是用的胎牛血清加a-MEM或DMEM，也有的用专用的MSC培养基的，此外，细胞原代培养的好坏、传代时间和传代的方法都会影响到细胞的生长。还有就是不同物种的MSC培养难易不同，个人感觉动物寿命越短越难培养。
( a6 r4 G6 h1 R, Z! @0 s9 n至于多向分化能力，如果确实是MSC的话，只要培养条件合适应该是不会明显改变的。。

清影

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) A" i5 |! K; t" }+ k; I; {保持干细胞特性无限传代很显然是不可能的……
/ w# V0 c5 h" T# u* K想问一下你做到干细胞特性最佳状态是的判断标准是？？
! H) |, V* @. F* k, `$ b  D嘻嘻，新手上路，见谅……

yinjiqingqq

stem cell 的干性维持应该与其生长的环境密切相关的吧，SC在生物机体内生长环境一般称作niche，所以在体外培养一方面要模拟细胞在体内的微环境，一方面还要刺激干细胞在体外的增殖，因为干细胞在体内处于正常的机制时，应该是处于静息期的。培养过程中外环境很重要，不仅是培养液，消化液，还要注意温度，光照，含氧量等等。

清影

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  R2 b, y. Y8 S8 ~
& I  V# I9 _1 u+ Q- l1 k8 G

zhmgeneral

低氧培养有助于干细胞干性维持，甚至老年供体的干细胞经低氧培养后也可以达到青年供体干细胞的活性。详情PUBMED上搜，有很多篇文献可供参考

木木ly

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& \2 [8 U; d% q" s( \* ?0 r0 W" u9 B8 S; B$ \- w0 V. A
MSC干性维持的条件，我们这边的实验室都是加VEGF（10ng/ml）EGF（10ng/ml）来维持，效果不错，传到10代根本没问题，状态很好。