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楼主: deron
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DMSO-free的冻存液?这个可以有   [复制链接]

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藤椅
发表于 2011-4-20 17:48 |只看该作者
还有商品化的呢: 不含有DMSO和血清的安全有效地细胞冻存液 New CryoScarless DMSO-Free. x3 I& f- R; t6 W* X

5 V. u' k9 S# N1 Q8 E1 f完全不含具有高毒性冷冻保护剂(DMSO)和血清的新型细胞冻存液。能够进一步提高细胞冻存效果。
' b  _( _! U4 k" {3 T: b/ h( o! q  v" K& E( S* T! T
【特 征】+ c4 C2 H& ?' c& ?4 [7 P2 r

( u. N5 @5 Q+ R% R. J+ J* o低毒性:完全不含DMSO; ) q9 T/ I: e: U5 @" I
安全性:完全不含血清等动物蛋白质; 7 @1 V( Q) P7 ^$ t9 H9 I
可在低温冰箱(-80℃)长期冻存细胞;   E  m' _- F) K% K4 q2 P
无需程序化降温,细胞冻存操作简便;
& K. i5 H) h+ l$ z' [* B细胞存活率可达90%以上; / W7 e, o. p: g
能在保持部分干细胞分化潜能的状态下冻存。
3 s# L, U9 R5 |9 G7 b【使用方法】) t$ Z2 X/ a" c; c& b$ C6 s
( p7 L( i" D7 o! c5 Y# g
■细胞冻存:
( f1 {' w3 F; u. a2 a' H' t8 }& ]- ]0 X0 L6 U9 |
收集对数生长期细胞制成细胞悬液。
  j* E5 v5 x1 X$ t) {. L+ V4-10℃离心弃上清,保留细胞沉淀,加入CryoScarless DMSO-Free重悬细胞,最适浓度为5 × 105 - 106细胞/mL。
% d0 B( l2 X# p/ Q& C% ~+ }5 s将细胞悬液分装至冻存管中,于- 80℃的低温冰箱中冻存。
$ _. I' Q# m3 l; G. P  
; H2 B6 F) h0 F" |: [+ r, R4 b■细胞复苏:9 S2 Y0 c) n) R0 `$ W

/ A2 i  j# n" f% R  D6 M3 r$ G将冻存管取出迅速并置于37℃ 恒温水槽中轻轻摇晃使其快速解冻。(注意:浸入时不可触碰冻存管盖) 3 W9 a* `1 O; d0 s; I2 r
使用细胞培养或实验用的培养基(10ml左右)离心清洗。
3 p; |% Q6 j; P7 i0 s9 T  M 冻存细胞                    复苏24h细胞存活率/%
) u' G4 h. T1 E0 F6 M! n L929(小鼠成纤维细胞)        97.5 ± 1.2
6 g5 s9 s; h4 B% k" p( h* X2 m MG63(人骨肉瘤细胞)         93.1 ± 2.3
+ F8 D, N7 b+ j- }( [6 F0 F  A# \ HT1080(人成纤维肉瘤细胞)   90.2 ± 4.3
# L1 C# [  b) S9 {  { Colon26(小鼠结肠癌细胞)     92.3 ± 2.3 7 N* }0 y# l8 G* F
B16F1(小鼠黑色素瘤细胞)     94.2 ± 0.6
+ }5 h6 j; s& k" [$ S5 H KB(人口腔癌细胞)            91.8 ± 0.9
! Q' T! b7 p4 h1 c& Z$ \1 P Caco2(人结肠癌细胞)         93.7 ± 1.9
, P' g' {8 h# a# o+ d MC3T3(小鼠胚胎成骨细胞)    94.4 ± 0.5 ' G3 \1 j$ R! `8 y' z4 F
Jurkat E6-1(人白血病细胞)    88.4 ± 2.5 4 y, E7 `# u* i9 f
HUVEC(人脐带静脉内皮细胞)  89.9 ± 0.4 . x8 d3 y6 M1 c: M
HCAEC(人冠状动脉内皮细胞)  90.1 ± 1.6
! L9 u, e, ^. L# h$ b; Z0 B MEF(小鼠胚胎成纤维细胞)    94.4 ± 0.8
' K) k  G9 R5 ^+ \3 m& u hACh(人软骨细胞)           93.5 ± 0.7
* a9 W) ^% X, h6 n% P2 m* o
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deron + 3 + 10 不错啊
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

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沙发
发表于 2011-4-20 17:22 |只看该作者
先是serum-free,而今是DMSO-free。冻存技术的发展真是让人振奋
( e6 Y; V. q' e7 ?" ?) i9 d3 ^文中提到的是在玻璃化冻存中应用其它冷冻保护剂替代DMSO,在PVA存在的前提下效果斐然。但是目前来讲,普通的冻存方法尚无法做到
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