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减少消化时间,一般用3分钟就够了,建议每隔一分钟在显微镜下面观察一下: C, e1 H5 x5 j* _" J J/ `
另外使用量也是,比如我T75一般用3ml,T175一般用7ml,只要保证能完全覆盖细胞附着表面就行了。) l: j: B' M& B. m! x
消化完之后要用大量的带FBS的培养液中和trypsin,我一般用12ml的培养液中和3ml的trypsin; g. t0 P3 y+ \$ d4 o! L- `% w; Q
另外有时候细胞几乎已经被消化了,只是还有些粘着,你只需要轻拍培养皿侧面就可以把细胞震落下来。
+ X' ?3 F1 O2 b& A另外就是换用invitrogen的TrypLE™ Express,比trypsin EDTA性质更温和,效率更高。 |
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