转基因动物原核注射的注射针如何制作啊？

zpzp0312

原核注射时，DNA注射针怎么制作- f! y1 t3 o" ]7 K) v) l( w% N
是不是和ICSI或者ES细胞注射的注射针制作方法有区别
# [7 J7 g  b! {5 z/ z7 j& H+ w, }4 K因为它的尖端开口内径要小很多1 V" c# G1 Q+ {/ B1 f# w3 ~
我外行，一点也不清楚
# Q9 O; D# d2 Q( p* k0 v, g我就会做ICSI和ES细胞注射的注射针
0 I: H( s9 r, w/ a7 h+ [4 O) DDNA注射针太细，断针时必定会被加热球融化，造成堵塞吧？

yangpan521

不是有拉仪吗?可以设置数据，想要什么样的规格都能拉的出来，建议一些相关资料，这样可以改进，

zpzp0312

回复 yangpan521 的帖子
! v3 b& |7 X9 |5 Y+ P: i
5 U$ T2 l- B. Z2 C我的意思是断针，因为针尖内径太小
& M1 Q" c, G6 i) ^: ]- @断针时容易被玻璃珠融化，堵塞

hualin840518

把断针仪的温度调低一点
. z: I+ Q) ~4 Y3 W- K* f# _6 Z1 Q而且在加热铂丝之前最好不要把针接触到玻璃珠: e# s; Y! M  ~/ l1 a0 {
等温度升起来之后
- n/ O: @, ^4 U% S* O9 g在放大的视野中慢慢的把针靠近玻璃珠（在加热之前要调试好加热时移动的针能正好接触到玻璃珠)
4 V/ S% d! y0 d' f' \  p: G+ t然后迅速断开加热的电源6 F( Q5 E, V: Z1 v; @
这样应该就可以了* F& u5 s7 h5 E: v
不过还与做针的熟练程度有关
! R; j1 L7 N7 r: N2 A我是这样做的
& `6 ~, a& T2 ]2 F$ T* \效果很好！

ambassador

1.玻璃球温度调到30°左右，3 U0 h- I/ c' [, a+ N6 i/ p
2.将玻璃针调到与玻璃球同一界面（调至符合口径），3 h% U2 {. y" t. W; s
3.先踩住，使玻璃球升温，
) K2 f% _* z6 }7 C, t9 [4.然后调节旋钮，将针向玻璃球靠近，贴住，5 S9 G7 w7 s$ j% {( w
5.待玻璃针有弯曲迹象的时候（大约5-8s），瞬间移离玻璃针，此时将煅开玻璃针。( ~: f% F# E7 Y! e; x/ p
- b, A9 ?5 Y( u+ c$ i7 b- e5 o
如果上面的protocol还不行，只能怀疑是不是动手操作能力的问题了！

xiaomingxu

楼上两位说的只适合核移植或嵌合体用针，转基因原核注射用针不需要用煅针仪来断的，因为针尖部很细（<1um），不适合用煅针仪来断。 但是拉针仪参数一定要设置好，不同的拉针仪使用参数也不一样，需要摸索。参数设置好后拉出来的针直接可用于原核注射，如果有点堵塞或不通可以在holding上轻微碰碰，使口径稍微增大。

cony

楼上说得没错，最近我们在做原核注射，调查好参数拉出所需针尖喇口径后，再烧角度，烧完就可以了，不用断针。在使用时，将针类在持卵针上蹭一下，蹭出一小 口就行。

POPOLD

不需断针  撞针，就是装好针后 ，注射针撞持卵针

zpzp0312

回复 xiaomingxu 的帖子* H$ \- Y3 Y5 v, z0 }
2 {  s  U, a7 x2 z
谢谢9 }8 L. ]0 Q# ^: k
看来还是有明白人
) V& Y( _7 ?$ J前面几位说的都是细胞注射针，呵呵

zpzp0312

回复 cony 的帖子
$ X6 v9 G& k: F6 z  {
, {' \* ?4 S# ~" m& s: f3 j" [谢谢