转基因动物原核注射的注射针如何制作啊？

zpzp0312

原核注射时，DNA注射针怎么制作
* _  p0 W. W+ g) g是不是和ICSI或者ES细胞注射的注射针制作方法有区别/ Q' P" _3 f  [* R& w
因为它的尖端开口内径要小很多
+ b+ F* b% S# h% s+ R8 ]我外行，一点也不清楚8 E# K' t  R- Y1 u4 z4 K
我就会做ICSI和ES细胞注射的注射针
7 s) q% b: @: A1 q* HDNA注射针太细，断针时必定会被加热球融化，造成堵塞吧？

yangpan521

不是有拉仪吗?可以设置数据，想要什么样的规格都能拉的出来，建议一些相关资料，这样可以改进，

zpzp0312

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, Z$ z1 s% F7 E* e: d& p8 _4 \  K" d2 l  y' h( k/ j( C  T: Z
我的意思是断针，因为针尖内径太小
* R! m. ^3 i) q+ y& j2 Z6 Z3 Y断针时容易被玻璃珠融化，堵塞

hualin840518

把断针仪的温度调低一点7 v4 e- ?8 v  }0 c
而且在加热铂丝之前最好不要把针接触到玻璃珠! }" d. e3 \; t) w2 d* g, x
等温度升起来之后& R' p" W! C6 j" Z" N
在放大的视野中慢慢的把针靠近玻璃珠（在加热之前要调试好加热时移动的针能正好接触到玻璃珠)
5 Q, ^. |, P* m( |2 X1 ]然后迅速断开加热的电源; j& @8 ~$ c" i; ?
这样应该就可以了
& f8 P) Q- S5 k% C8 C不过还与做针的熟练程度有关
6 p1 ^7 u/ [5 W我是这样做的
* O+ P4 |. ?) y0 f( X! G/ T效果很好！

ambassador

1.玻璃球温度调到30°左右，
2 B1 t" ]2 D0 p' y1 b4 Y+ L2.将玻璃针调到与玻璃球同一界面（调至符合口径），
$ C, y: r7 t$ O; A0 U3.先踩住，使玻璃球升温，( y( l8 Q) j+ a$ H. r; l
4.然后调节旋钮，将针向玻璃球靠近，贴住，. J# Z3 E# }- ]9 q, B, C4 ^! [+ V
5.待玻璃针有弯曲迹象的时候（大约5-8s），瞬间移离玻璃针，此时将煅开玻璃针。( n! X" |! L/ A7 k& [

  B! W: S7 q) n( s2 ~- K3 j如果上面的protocol还不行，只能怀疑是不是动手操作能力的问题了！

xiaomingxu

楼上两位说的只适合核移植或嵌合体用针，转基因原核注射用针不需要用煅针仪来断的，因为针尖部很细（<1um），不适合用煅针仪来断。 但是拉针仪参数一定要设置好，不同的拉针仪使用参数也不一样，需要摸索。参数设置好后拉出来的针直接可用于原核注射，如果有点堵塞或不通可以在holding上轻微碰碰，使口径稍微增大。

cony

楼上说得没错，最近我们在做原核注射，调查好参数拉出所需针尖喇口径后，再烧角度，烧完就可以了，不用断针。在使用时，将针类在持卵针上蹭一下，蹭出一小 口就行。

POPOLD

不需断针  撞针，就是装好针后 ，注射针撞持卵针

zpzp0312

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+ D# s! S6 R8 r5 X5 N  ^
谢谢
4 x4 E. R' }  o, a; p看来还是有明白人1 H' j* o: P' Y* m; S
前面几位说的都是细胞注射针，呵呵

zpzp0312

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6 m1 O# A+ V3 {9 f, o" j
; Y1 E+ w0 ?0 _谢谢