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本帖最后由 nculsa747 于 2011-11-13 14:11 编辑
$ N/ H4 i4 [' e5 d g8 u& b4 I$ ]# v( H% b
或许下面才是你真正需要知道的:
4 R3 b3 F; D9 \3 vPlat-E包装细胞系(Ecotropic)是一种来源于人胚肾(Human Embryonic Kidney, HEK)293细胞系,主要用于快速、短暂地产生高滴度逆转录病毒,同时也能用于稳定地产生逆转录病毒。由Plat-E包装细胞系产生的病毒表达一种单嗜性的被膜,因而只能感染小鼠和大鼠细胞。
7 H: o$ I+ b6 t+ K$ ZPlat-GP包装细胞系(Pantropic)也来源于HEK293,但却是一种泛嗜性的包装细胞系,其包装产生的逆转录病毒颗粒既能感染哺乳动物细胞,也能感染非哺乳动物细胞。在使用过程中, Plat-GP细胞需要用逆转录病毒载体和pVSV-G来共转染。VSV-G是泡状口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus) 的被膜糖蛋白,能通过脂质结合及质膜融合来介导病毒进入细胞。因此在使用Plat-GP细胞系时,还需要额外的使用pVSV-G完成包装。
3 K1 ~+ C+ J% T/ OPlat-A包装细胞系(Amphotropic)也是一种来源于HEK293细胞的细胞,在将病毒env 基因导入该细胞时利用嘌呤霉素作为选择标记,因而对于一些使用嘌呤霉素作为筛选标记的载体无法使用。5 h m9 O2 K' n* j* _' `8 T+ d
一般来说,Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞;Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞(但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G,该外壳蛋白宿主范围非常广);Plat-A其宿主范围比Plat-E要多一些,比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等。+ Y' v9 _9 m9 n3 r: [
- ?+ g( b: v$ W9 F" x) j
以上三种细胞用来做retrovirus,如果做人的iPS,你应该选择plat A;做鼠的,就选plat E。- B; G% d. E I' S2 h x# k U: B
293T一般用来包装lentivirus。9 T- p; L7 T7 p: F9 X: k
祝好! |
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