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[请教] 请问293T和plat-E细胞包被病毒的区别?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-5-11 19:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问293T和plat-E细胞包被病毒的区别?,谢谢了!
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金话筒 优秀版主

沙发
发表于 2011-5-11 21:08 |只看该作者
Plat-E细胞中含有病毒包装组分,只需转入表达载体,293T是的癌细胞,生长速度快,转染时必须带上包装组分。
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藤椅
发表于 2011-5-11 21:52 |只看该作者
学习了!

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板凳
发表于 2011-5-12 07:30 |只看该作者
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Plat-E包装出来的病毒只能感染小鼠的细胞
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专家 优秀会员 金话筒

报纸
发表于 2011-5-12 13:16 |只看该作者
293T是一种常用的病毒包装细胞, 本身不能表达病毒包装蛋白, 因此包装时需要将病毒包装质粒和病毒质粒一起共转293T细胞才能包装出成熟的病毒. 而包装出的病毒能感染何种宿主细胞需要看你用的包装质粒的性质.# }( c. v' g( N) {* y" w! V  H. B

  {* B4 r/ R2 i: V, APlat-E是在293细胞基础上改造而来的一种工程细胞, 其本身可表达逆转录病毒包装蛋白, 因此只需要将病毒载体直接转到Plat-E细胞内即可包装出有活性的病毒, 但是, Plat-E包装出的逆转录病毒只能感染携带Slc7a受体的细胞, 而这个受体是在小鼠细胞中表达的,因此这种病毒只能感染小鼠细胞, 而要用Plat-E包装的逆转录病毒感染人细胞, 需要首先用Slc7a受体基因的病毒感染人细胞,使其携带这个受体, 然后才可以用这个病毒感染
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地板
发表于 2011-5-13 09:17 |只看该作者
谢谢大家的帮助!

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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2011-11-13 14:09 |只看该作者
本帖最后由 nculsa747 于 2011-11-13 14:11 编辑
+ `/ ]7 ?1 v, K8 x
( v8 x  F4 o1 `9 M' O或许下面才是你真正需要知道的:$ h: h" l" w* c; ~, E/ M
Plat-E包装细胞系(Ecotropic)是一种来源于人胚肾(Human Embryonic Kidney, HEK)293细胞系,主要用于快速、短暂地产生高滴度逆转录病毒,同时也能用于稳定地产生逆转录病毒。由Plat-E包装细胞系产生的病毒表达一种单嗜性的被膜,因而只能感染小鼠和大鼠细胞。
0 F# O2 E! L6 _/ G* S1 MPlat-GP包装细胞系(Pantropic)也来源于HEK293,但却是一种泛嗜性的包装细胞系,其包装产生的逆转录病毒颗粒既能感染哺乳动物细胞,也能感染非哺乳动物细胞。在使用过程中, Plat-GP细胞需要用逆转录病毒载体和pVSV-G来共转染。VSV-G是泡状口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus) 的被膜糖蛋白,能通过脂质结合及质膜融合来介导病毒进入细胞。因此在使用Plat-GP细胞系时,还需要额外的使用pVSV-G完成包装。
" q' ~4 z" y) [5 OPlat-A包装细胞系(Amphotropic)也是一种来源于HEK293细胞的细胞,在将病毒env 基因导入该细胞时利用嘌呤霉素作为选择标记,因而对于一些使用嘌呤霉素作为筛选标记的载体无法使用。, f5 @! p7 Q5 `0 e: M. O
    一般来说,Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞;Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞(但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G,该外壳蛋白宿主范围非常广);Plat-A其宿主范围比Plat-E要多一些,比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等。
- N$ Q& {" N4 M* R, ]( `4 n) f
; j$ w/ G. `0 M+ Y以上三种细胞用来做retrovirus,如果做人的iPS,你应该选择plat A;做鼠的,就选plat E。
! G* Z. R- u4 [, V" p293T一般用来包装lentivirus。9 Q7 h" w* Q) Q$ f
祝好!
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发表于 2012-2-2 13:23 |只看该作者
很好的介绍

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发表于 2012-8-25 20:57 |只看该作者
也就是说,经典的pMX载体携带转录因子基因,与VSVG重组质粒一并转入plat E,包装出来的病毒可以扩大感染对象,例如人、猪等?

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发表于 2012-8-25 20:58 |只看该作者
回复 nculsa747 的帖子
6 ~- N3 h/ c6 V& `& [: ~4 T+ J- d% S' h3 a4 A2 `) {7 ~9 }2 Z
也就是说,经典的pMX载体携带转录因子基因,与VSVG重组质粒一并转入plat E,包装出来的病毒可以扩大感染对象,例如人、猪等?
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