细胞免疫组化

zhbshi998

有谁做过小鼠胚胎干细胞免疫组化的，介绍下！我做了两次就是按照常规的细胞免疫组化方法做的，结果只有极少数集落成黄色，基本是阴性结果，希望有谁做过的传传经验吧，万分感谢！

临床干细胞

我没做过ES，但做过成体的，和你正相反，非特异性染色很多

ljs

1.免疫组化是免疫组织化学，针对的是组织样品，免疫细胞化学针对的是细胞样品。这两个概念别混淆。
% T  i. H9 N) a$ ?* @" V' ?2.你要测的抗原是什么，目的是什么，样品是组织还是细胞。最后的阳性结果是黄色吗？是什么显色方法？不会是细胞化学染色吧？和免疫没有关系。

aminhair

一、要做对照，否则无法判断实验结果的可信性。
1 j& |& ?* L/ G二、如果是过氧化物酶等方法显色，需要在不时观察，确定染色最佳时间。
6 T. E- i! X0 o: g, h* c9 f三、预试验中应该摸索一抗和二抗的最佳浓度。. n- G4 F2 d' X0 s  t* {! d
四、封闭时间不要过长，一抗可以再4度过夜。

zhbshi998

哦，上面说得有理，首先是概念要弄清楚，然后实验要设计严密

james_0619

免疫组化和免疫细胞化学原理是一样的，你做出来只有少数是阳性细胞，那么你要分析下了% w" Y" U/ h2 D9 L; e# \$ c! c
dab显色时间是不是不够？
8 f# f; }0 S7 j' \抗体孵育是不是不充分，不均匀？
9 ?' E0 Z7 f" Q0 {, |; B6 A要是你做免疫细胞化学比较熟练了，也就是不会出现以上的问题了，那么你的一抗是不是不好？这就要作对照了，阴性对照和阳性对照都做下