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[请教] 测序结果 [复制链接]

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美女研究员

楼主
发表于 2011-5-24 08:50 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
华大回复:您的样品杜INH_1两端引物的测序结果均为非单克隆。' ]$ k$ M" K0 x! E9 j. b) W0 a
请问非单克隆是什么意思呢?
; J- t! n& T) }& d根据网上公布INH全序列设计引物后,我的扩增条带比预计多2k,测序结果显示内含子上插入2k片段,这是怎么回事?
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沙发
发表于 2011-5-25 16:21 |显示全部帖子
回复 chineselangzi 的帖子5 O  M, e& Y8 A( ?6 @; j% W
6 e, j3 h( A! N9 U: o
我用的是pmd-18T载体,如果说是扩增目的片段以外的片段为何会处于目的片段中间,而且多于的片段位于内含子区域,测序结果显示存在重复序列。如果我用cDNA为模板扩增,得到的结果和网上的完全一样。
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藤椅
发表于 2011-5-26 21:23 |显示全部帖子
回复 chineselangzi 的帖子4 u2 @' ~- {: J+ Y1 ~( x

9 F4 L, a& j5 G. ?* f网上公布的内含子大小为996bp,而我的结果除了两段外显子外,在内含子内部还多出来1800bp的序列
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板凳
发表于 2011-5-27 10:08 |显示全部帖子
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回复 chliu 的帖子6 K9 X4 V5 I+ d  l. d( f. q1 H; A

6 j- f; H4 Z$ S5 i9 J网上公布参考文献和我的都是一样的,为杜洛克猪。文献中说是996bp的内含子。我是用来构建敲除载体的,应该内含子部分对我的实验还是比较重要的
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