MSC成软骨的诱导与检测

Learner

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2 c# W5 P7 h8 F$ T* L! z) e/ v最近正在做MSC的成软骨诱导，查文献很多都是在pellet的情况下诱导。我本人试了两种方法。一种是离心后在离心管里以pellet的形式诱导。另一种是在十二孔板里以小细胞团的形式诱导。个人理解pellet诱导需要做石蜡包埋，组织切片然后再用阿利辛蓝染色比较繁琐。小细胞团的形式可以直接试试固定染色。请做过的朋友一起分享一下经验！
2 ~; Y% \5 I" G, |5 a9 k我的诱导剂配方是不含血清的培养基：
4 F% T; n; `" z7 N. A" W/ o•        DMEM plain, high glucose, with L-glutamine 0 Y6 ~, g# c$ W& m8 }9 r
•        1% Non essential amino-acids* T, X2 J: t" j- `: Y
•        1% Pen-Strep or Pen-Strep-Fungizone
) g6 n' G) x6 P, m% N•        6.25 ug/mL Insulin, Transferrin, Selenium (ITS + 1) (1 mL stock/100 mL media)
- b& p. ?( B4 c  N! ~6 O•        100 nM Dexamethasone (10 µL stock/100 mL media)/ p9 i! z5 h. ~, g
•        10 ng/mL TGFb1 (1 mL stock/100 mL media)
: S$ o  i: }0 x6 \. F' z& d8 w) w

huajie881026

我也做了成软骨，打算明天石蜡包埋，阿里新兰染色

ytumuyangren

pellet诱导能否给我们具体讲解一下，目前我做的是这方面的实验，主要是pellet养几天就后崩解，诱导液中的成分和您帖子里提到的是一样的。

细胞海洋

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willow0711

楼主您好，请问您说的“小细胞团的形式可以直接试试固定染色”，这种方法染色后，对照组和诱导组差异明显吗？谢谢

lordstar

感觉诱导效率就是很低，msc的纯度应该也差不多了。脂肪细胞应该是更好诱导的，但也并不是每次能成功。。。诀窍在哪呢