脐带间充质干细胞培养

sunjianhua2000

我5月20日做的脐带原代培养，方法是组织块贴壁法。6月3日（第14天）镜下观察虽然有10个比较大的细胞克隆团，而且克隆团细胞密度非常大，但从低倍镜看细胞还没有铺满到整个培养皿的80-90%，请问这个时候是要进行传代还是要等到长到培养皿的80-90%才传代，犹豫中。我看了一下文献有的说不必等到全都布满80-90才传代，只要细胞克隆团密度够大就可以了。请有经验的大侠给予帮助！

get0715

原代贴壁法到了你说的程度已经可以传代了，一般等不到80-90%，因为原代都是以克隆的形式生长出来的，如果克隆中心的细胞已经没有足够的空间生长，时间长了就会卷而死掉的，所以原代传一代只要把握好传代的浓度，不要太少了，完全可以长起来。6 U' N  ?7 z& ~9 @  t3 h5 B7 Y
你说的80-90%才可以传代前提是说细胞在细胞瓶（或平皿）中均匀接种的情况下，细胞达到80-90%的密度传代是最佳时机。具体情况要具体分析噢，呵呵！

get0715

对了，你说原代已经培养了14天了，你最好在今天传代了，时间刚好合适，我觉得你的细胞生长状态应该不错了。而且明天开始放假哦，你可以今天按正常传代密度接种，细胞完全可以培养3-5天。

1301918986

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) I3 ~5 W6 R/ e5 k4 c* l; i, r# {我们做的原代差不多十二天左右就有比较多的克隆了，而且等到克隆周围已经比较密集的时候就可以传代了。若要等到全部铺满似乎不可能吧，而且这样的话比较密集的细胞状态会不好的。

zhangruiting

原代细胞的传代不是要等到长到70%-80%，而是根据细胞的生长状态定的，有时候细胞的生长量比较少但是局部的细胞已经长到爆掉（就是已经脱离培养皿），所以最好是观察细胞的状态而定。

水兰色

可以原瓶传一下，让它均匀分布，再长3天后正常传代

wangweilie0418

同意进行传代的看法，我们也是这么做的。

xiaorui

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我想请问你用的是什么培养基？