用EDTA消化细胞，具体怎么配？

neurology930

请问大侠，用EDTA消化铁壁细胞具体的配方，还有大概要消化多久？4 a5 @* E- o  q* Q
谢谢!

临床干细胞

EDTA怎么消化？你是想问trypsin-EDTA胰酶吧，这东西都有卖的，消化时间看你细胞，什么时候细胞都成球不再贴壁了就行了，记住干细胞不要等到消化成单细胞再离心

SCNT

一般使用trypsin-EDTA胰酶消化细胞，只要细胞恢复或接近圆形即可

sherolily

一般使用的是trypsin-EDTA胰酶消化细胞，我一般消化2-5min，在显微镜下观察细胞形态，大多接近圆形就可以了。

snany

EDTA-Na2 是一种螯合剂，主要作用是使细胞分散形成单个细胞，与细胞消化无直接关系。一般使用浓度为0.2G/L

czzhaozhu

读文献时我也看到直接以EDTA来消化细胞的，浓度为0.1%或0.2%的都有，我用过的是0.2%，用PBS来配的，由于EDTA难溶解可以加NaOH，配好后过0.2um的滤膜即可使用；消化时一般2-3min就性，但如果细胞较大，贴壁较牢，可延长时间。

ndwzf

不同的细胞所需时间不同，要自己认真总结。在镜下观察，待细胞变元即可

xiangchou812

不知道别人怎么配的，书上说的是0.2%的EDTA，不知这里的EDTA是指钠盐不是。我们一般用的是EDTA－Na4。我发现用0.2%的4Na盐时，细胞不太好消化，后来改用0.3%的，发现挺好。

大少爷

我们做MSC，用的是0.25%的胰酶浸泡贴壁的细胞表面，消化3-5min就好了，倒置显微镜下当细胞変圆，成片收缩，加培养基终止消化。但是不同的细所用的胰酶浓度会不同，且有些细胞消化时，胰酶里会加EDTA，消化时间也会不一样.不知道你说的是哪种细胞，你最好说清楚。

xiaogao

是用胰酶-EDTA消化细胞，而不是EDTA消化。可以直接买成本，也可以买粉末自己配，一般可以采用0.05或者0.25%的进行消化，显微镜下细胞变成球形就OK了，一般2-3min就好了，消化时间不宜太长，太长会影响细胞状态