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间充质干细胞培养的双抗使用   [复制链接]

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发表于 2011-6-13 12:53 |只看该作者 |正序浏览 |打印
做SD大鼠间充质干细胞过程中,双抗的使用剂量,请给交流指点下经验
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发表于 2011-7-22 19:47 |只看该作者
双抗有风险,使用需谨慎!

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发表于 2011-7-21 21:18 |只看该作者
抗生素类作用主要是抑制而不是灭杀,建议在细胞培养过程中不使用双抗,严格保持室内环境的洁净程度和严格实验人员的操作,完全可以避免人为性质的污染。
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发表于 2011-6-18 10:03 |只看该作者
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一开始培养细胞加双抗很容易污染,后来不加反而不污染了,究其原因可能是因为加了双抗操作就不太注意无菌,心想反正有抗生素呢,所以培养细胞不能把希望寄托在双抗上,无菌操作是第一位的
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发表于 2011-6-17 08:08 |只看该作者
一般加量是1%,但是实验室条件好的话,可以不加
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发表于 2011-6-16 22:43 |只看该作者
我认为应该依照自己所在实验室条件来定,如果实验室无菌条件不达标,可以按照100:1的比例加双抗,但是做转染的细胞是一定不能加双抗的
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发表于 2011-6-16 22:20 |只看该作者
双抗对细胞生长和状态都不好,建议严格操作,不加双抗。
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发表于 2011-6-16 21:42 |只看该作者
我们在做MSC原代培养的时候,从来不加双抗,自己注意点污染的可能性很小,况且双抗的作用持续的时间不是很长,所以只要自己注意点,操作的方法正确,一般不会污染的。
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发表于 2011-6-16 13:48 |只看该作者
同意楼上的说法,我们一般在取材时的储存和运输培养基中加入青链霉素和两性霉素,在培养过程中就不再加入了,抗生素对干细胞影响很大!
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发表于 2011-6-16 09:01 |只看该作者
同意楼上各位的意见。* P. j* k4 [* N& Z9 o& J
双抗的用量一般是按青霉素100IU/mL+链霉素100ug/mL。一般配制成100倍浓度的贮存液用时按100:1加入。
" h0 I* S5 L8 J  s一般我都是在取材时加入(主要是心理作用),以后就不加入了。若是无菌操作严格,无需加入。
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