MEF 防止老化的技巧

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最近的MEF常常是开始时好，代数多了P3以后，生长超过3-4天就容易出现老化的迹象，这个可以预防吗？个人觉得密度稀了，后来就老化了，还有其他的注意的地方吗？ 这个问题可以通过改善实验细节避免吗？

czzhaozhu

MEF合适的生长密度是生长2天就传代，如果4天才能长满，就是刚接种时密度有点稀了，细胞容易老化，长过了后会影响灭火后分泌因子的能力，所以接种时细胞密度一定要控制好，计数要准确。

hansey

传的代数多了也是导致细胞老化的一个原因，建议P3前用

huangcong1988

密度稀了,应该不是老化的原因吧，不过密度太稀也会影响细胞生长，主要是传代多了吧

ljs

楼主如何确定细胞老化？老化在形态上表现为细胞扁平、体积增大等等。β半乳糖苷酶检测试剂盒是检测细胞衰老的一个方法。简单便宜。从一个有限细胞系的全部过程来看，其他的条件完全相同（当然是不可能的），细胞是表现为随着代数的增加，衰老的细胞也在增多。但从某一代来看，和操作者本人的处理有很大关系，如：1.细胞浓度，太大，有接触抑制，营养不足等等；太小，细胞分泌的生长因子被稀释了，进入衰老。2.胰酶消化：胰酶会损伤细胞结构，造成衰老，甚至死亡。3.细胞活力，这个和细胞的个体来源（如年龄、取材部位等）有关系，同种细胞，不同个体的细胞活力是不同的。总之：任何对细胞不利的条件都会对细胞有影响，进入衰老，但是通过改善条件，从新传代，细胞的衰老还可以恢复到细胞所处那个代数的衰老水平的。