请教几个关于脐带间充质干细胞的问题，流式鉴定，和UItraCULTURE 无血清培养基

zhanglei1414

今天做流式鉴定29,44阳性，34阴性，但是45居然是阳性！！！！1 U. _, c% [! s1 {) q
: T2 {( f- T& r7 ~2 H( J
请问大家遇到过类似的情况吗？帮忙给分析一下为什么会这样呢？! A7 G: A6 o# t- w

9 k' _: s3 t0 Q3 _' e难道MSC已经分化，而且还能分化出造血细胞的抗原吗？  H& n4 @- `1 f8 f* }& Q

& u- c5 Z" b) w! \( E求解！+ {$ j$ L5 F5 H: t! i
: [% a1 `9 P- H, ?" u! Q
顺便问下谁用过UItraCULTURE 无血清培养基，我怎么在网上查不到这个东西？4 j' x% Z, [1 `* x) Y$ D
& z3 p- X- X7 _: D  n( G
谁能提供点资料？
! ?, E8 H, v6 S; ]1 D$ [: h+ ~& U2 R6 W
谢谢谢谢啦！！！

sdyinong

我们之前做的脐带来源的MSCs，CD45是隐性表达的，你的细胞是刚分离的还是培养了一段时间的，UItraCULTURE 无血清培养基培养基没用过，是培养MSCs的吗？我们用a-MEM+10%FBS+1%sp+1%gln，

gact

sdyinong 发表于 2011-6-17 17:18
- ]! `) G" T2 D9 |( v4 ]7 `$ K我们之前做的脐带来源的MSCs，CD45是隐性表达的，你的细胞是刚分离的还是培养了一段时间的，UItraCULTURE 无 ...

* ]4 S0 L1 F4 V, F9 t& G你这是做人的吧，首次分离，什么时候长满？传代一次，什么时候长满？
9 h2 @3 ]# O9 q+ s# Q/ s# u我用的是F12+20%FBS，传代一次，大概10d，还没长满，只是几个大的集落而已。
( F7 c+ H* `( h: o' I6 U2 H  P+ @能分析原因么，
. @: ]; z3 t( M0 ?0 x( q$ t( Y+ h% W1.是不是没有加NAA、FGF、LIF等因子？+ H8 X  i) v" _4 G5 C: K
2.是不是非要用MEM-Alpha培养基？
4 w( ?/ O0 }* j9 }3.加双抗是不是影响生长啊？

sdyinong

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3 ]& x# c5 d% \$ d9 n+ N( Q2 c
, o( m/ B" X4 g( Y) m! }做的是人来源的，首次传代1:3基本上三天就可以长满，那些细胞因子FGF本来也打算要加的，但是后来没加也一样，加SP不会有什么影响，培养基用MEM-alpha较好，不过有的文献里直接用DMEM培养也可以，我试过不如MEM-alpha好
) b& |0 o1 [# w6 r

zhanglei1414

我做的是人的脐带，传了两代了，但是做流式45阳性，所以很奇怪啊，不可能养出来造血的吧？/ Z& d% n- _- M  ]' }

7 y2 z+ j5 F' J! [5 h' _9 j& }0 C很是郁闷啊，29,44都是阳性，34是阴性的
/ ^: Q/ C. L' t( A8 x  h* U( B% p+ @4 @7 B! e
我用DMEM/F12+10%FBS养的，能养3-4代，再往下就不敢传了，状态不好了，MEM没用过
& S- g, I, O8 n  [6 |' H& O; r0 E

sdyinong

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' f3 M4 l# s4 p/ a& ?
2 E% S1 R: z6 Z9 W2 I% h7 Y用MEM-alpha可以传8-12代，前8代做实验基本没有什么问题

leungyk

這是UltraCulture的product insert5 `' A; _& q# o% |  b% C# A8 y* S
http://www.lonzabio.com/uploads/ ... al/Ultraculture.pdf# c, k& \0 D' c' x

5 T4 p: z% f( F* x: M# e我在網頁上也找不到這東西，要直接問代理，或在Lonza 的 Catalog 2011-2012內才能找到！

zhanglei1414

回复 leungyk 的帖子- y7 K3 u: Y, y$ M' e
' X% e* P- s2 m2 M8 Z+ Y
哪家代理的？我都找不到这东西，也不知道这种培养基效果如何，一直用FASGROW，感觉不咋地

leungyk

2 |! J) J! v1 V/ F9 v; Y" L* d) [0 e4 h8 [, {: I$ M6 X% U
回复 zhanglei1414 的帖子' I: X  x% {) I. D. F  M
+ n5 X2 @* {1 o7 I
我在網站留言，自有代理回覆

紫电苍炎

回复 sdyinong 的帖子* }0 Q  L9 v/ A* Z5 F* }$ F

" b' y5 Y& m7 }, ]: k8 W1%sp+1%gln  这2个是什么成分？ 我这边培养没有添加，询问下。