求救，转染的问题

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要是向ES或者IPS内再转染一个目的基因，有没有谁做过啊 ，给些建议啊~多谢了

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4 }  t, |1 j3 M. p% [+ y是不是说相当于悬浮转染了呢，就在试管里进行转染后4h的孵育

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回复 sdyinong 的帖子6 o; X" S5 {; P" D2 i% f1 N: D
* Y9 S2 Z! |! [" N$ E& B( {% H
你好，请问你那里有没有文献可以让我参考一下啊，就是关于慢病毒感染ES细胞9 }, Y7 w/ R/ N8 h2 v5 ]' I

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回复 bllx58 的帖子! P3 I  F. U8 l7 p
3 \! {# R' \+ C# t; c9 l  Y
我和没有确定方法，脂质体，电转，病毒感染都想试一试，不知道哪一种好些

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回复 sdyinong 的帖子
! o8 V+ [$ I# a* ^$ h, s
- c2 a5 [6 P4 O, {' h& ?谢谢啦

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回复 wwy551 的帖子
+ v( j+ w( f. s: m4 c! m) F( U0 u* G. f2 T$ f4 m4 v
2500RPM这个转速会不会太高，还有想请问一下，如果要是转染ES，消化为小的细胞团块，怎么计数呢，是一个什么样子的细胞量呢，还请说的再详细些啊，谢谢啦

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回复 sdjjfangfang 的帖子
& a, }3 [- D0 C6 s7 X6 f) b% M' U9 V* y$ ~
"转毒之前可以将细胞转到feeder free上进行培养”可是我的ES和ips都是在feeder上养的啊，没有feeder的没有养过啊，这一点是不是必须的呢？是为什么啊？, K, @# {! Y$ z
“可以考虑根据ES的状态调整何时更换培养基”是指感染后的状态么？怎么掌握啊~！
8 k, P3 x0 ^. e& X还请说的详细些啊，我真的不是太明白。谢谢啦

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回复 wwy551 的帖子2 a6 g- J: b; }- J) K

( ?5 t; ~3 c4 g+ L' H8 B& w“转染ES的时候，不用计数啊”如果不计数的话，是怎么判断病毒感染ES时，是怎么的量呢？我很茫然……/ E4 Y6 q4 ^" z1 F5 c
“保证病毒肯定是过量的就可以了”是怎么确定过量？
2 W  n: z0 L1 t5 D/ ]! L' N1 M) |"而且也没必要转染特别多ES，"是怎么才是感染的多或者少啊，怎么判断，怎么计数啊，是数克隆么？
5 u. B& V0 K% p2 P' [哎，我太菜了，请多指教啦7 k6 }0 D7 ]7 K/ m' C

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回复 wwy551 的帖子% X$ p) E4 ^) C1 B7 M; a
/ ^5 K* o3 I( z' M  w' W, E6 g/ q9 k  ~
能不能有你们发过的文章或者相似的文章给我借鉴一下啊 ，或者是有没有类似protocol的文字啊……  W' I5 w- B& T7 Q* ~  v
哎，主要是我没有做过，就觉得哪一步都很不清楚，很不确定的感觉，! E" @2 C+ `+ T" _$ n, \
谢谢啦

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! W% u% ~5 Y' a6 }- T
; Y" Y( j4 |2 T, [& ~4 [好的，谢谢！如果再遇到问题再向你请教了~