求救，转染的问题

sdjjfangfang

病毒的滴度一定要高哦，转毒之前可以将细胞转到feeder free上进行培养。可以考虑根据ES的状态调整何时更换培养基，如果掌握的好的话，可以提高病毒的转染效率。

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回复 always_wp 的帖子5 m* t* \& H5 }* Y
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在feeder free上培养是为了去除MEF。最好这样做，把MEF去干净些。把病毒转染入MEF里比转到ES里更容易些。貌似你也不需要转染有目的载体的MEF吧。还有一个问题是，如果载体本身带有GFP的话，最后应该进行分选。这样就会带一部分MEF在分选的细胞里。虽然可以通过细胞的不同大小把ES和MEF分开，但是还是会夹杂一部分MEF在里面。
$ [* M2 R' ^! E“考虑根据ES的状态调整何时更换培养基”是根据转染后的状态，如果细胞状态好一些，可以考虑补加培养基，而不是把含有病毒的培养基完全更换掉。如果细胞状态不好，则就赶快更换新的培养基吧。$ h( C5 B7 E7 Z- `/ G: H$ T) d# r+ O

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回复 always_wp 的帖子* U& ^# D4 |0 ~1 c/ v  a, i
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把ESZ转到在Matrigle 上培养呀，之前可以考虑用沉降或者是低速离心的方法去除MEF