白细胞成团的原因和处理方法

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脐血干细胞分离以后发现白细胞成团怎么都吹不散，然后我用细胞滤器过滤以后放在75瓶里培养。第二天发现细胞又成团了 ，我以为是细菌污染，但是无菌检测瓶检测结果显示没有污染。而且培养基也没有变色浑浊。我想问一下，细胞成团的其他可能的原因和解决办法。

langziforever

我想问一下用什么方法分离的？用磁分选吗？不了解，如果是会不会你分选介质导致的细胞和磁珠的非特异性聚集？因为以前用磁珠去分选有核红细胞时发现加入抗体标记的磁珠会导致细胞成团，而这个时候可能简单的吹打根本打不开的!以上纯属猜测啊！继续讨论！

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回复 langziforever 的帖子8 h! N  ?( _3 I' J# Q) V+ S  `6 ~

3 W- H% D) V7 u4 p3 D$ J7 M- B1 k我用的淋巴细胞分离液用密度梯度离心的方法分离的

langziforever

回复 352167963 的帖子- w1 L7 t+ I; d/ e) O$ r& |

; @0 Q: ^5 D+ k& X4 b那我怀疑是不是你脐血放置和抗凝的问题，我用脐血，同样用密度梯度离心没有出现过细胞结团的现象，血液一般在2个小时内用！

352167963

回复 langziforever 的帖子( @7 @1 e: d3 W1 N- y: B
. _9 L. _# H6 U4 I' k
应该不是脐血超时的问题啊   我做过好多次了  一般的轻微凝血也没有太大的关系。但是这次我是用细胞滤器过滤以后又出现成团，然后3天以后，又自动分散开来。

皮搋子

个体差异问题，有的人的就是很容易结团，有的人的就是不洁团单个生长。

352167963

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+ H, L/ ]( V8 T& i7 J. G+ K' E4 R' y
也就是说这是正常现象吗  ？？
) m7 V6 c' j! E1 u: V% Z

youtellme

采集时候的问题肯定有，像你们公司嘛，采集脐血估计不标准的，哪有扔个袋子给医院就采的，看看采血规范吧。你这不第一次成团了。应该一点点排除原因。* t/ H* t' {, W6 f/ h
1减少一次裂解时间& l* r7 Z2 g% C! w. z
2增加裂解次数，如果裂解效果不理想的，多次短时间的做嘛，不要心太急的。7 y8 B( N9 v1 K! s$ U0 w3 _
3免疫细胞本身也容易成团的，没啥事，但你这时间有点快的。
3 R6 [9 z/ L# Q6 V4解决后告诉大家，一个问题问多次要有个解决方案的。

352167963

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& U( V! w$ Y$ A3 ]) a# b5 A4 s谢谢啊 采集的问题我们公司也开始重视了。前一段时间，增加了医院采集人员的培训。也就是采血过程的规范操作。然后，关于这个问题的解决方法还是没有。因为成团的现象很少，大概分离100份出现一次，然后公司这边也不是很重视，成团的就废弃了。我也不是太懂。只能培养一段时间看一下，发现成团的细胞在培养了3天以后就自动的分散开了。至于成团的原因，出了你上面说的几样以外，还有人说可能与静电有关，但是实验室条件有限，一一验证不大可能啊 。