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试着提了两次大鼠原代BMSC,均以失败告终,前辈们给些建议吧,万分感谢   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-7-14 09:48 |显示全部帖子
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你好,我培养的是WISTAR大鼠的BMSC,觉得还是比较好养的。想和你分享一点体会:我取的是下肢共四块骨头,每块一瓶,在注意无菌的前提下一定要加快取骨的速度,时间长了细胞的活性会降低。也不知道你用的大鼠是几周的?一般5周左右的各个方面都是比较好的。三天换液的时候细胞量不是很大,但是1周左右可观察到较多的细胞巢,如果细胞局部很密集,可先行原瓶打散,不要急于传代,因为细胞量少的话会影响细胞的生长。您消化的时间可能有点长,消化时要在显微镜下观察,不是一定要消化多少时间,当观察到细胞皱缩快要脱落的时侯就停止就好了,消化时间过长对细胞影响会比较大,甚至会过度消化致死。希望这些体会会对你有所帮助,祝你早日成功!
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