试着提了两次大鼠原代BMSC，均以失败告终，前辈们给些建议吧，万分感谢

lizhiyong

回复 taoli10000 的帖子9 V, ?8 E2 C5 o; V
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你是等于全骨髓培养的；为什么不尝试冲出骨髓液之后，过大鼠淋巴细胞分离液，取单个核细胞，用DMEM+10%血清（我用的是Hyclone公司），大约原代需要8天左右可传代，中途可以半量换液，尽量不要天天关注细胞（因晃动，影响贴壁），双抗加的浓度太高，千分之一至千分之三，足矣；多了不宜。传代消化时间不宜过长，0.5%的胰酶+EDTA，约需3-5分钟，镜下有松动，吹打几下，就会掉下来。圆的细胞可能是巨噬细胞等淋巴细胞，3次传代几乎可以排除（其贴壁较牢固）。希望对你有用。。。