MEF状态的影响因素有哪些？

christophe

最近连续做了几批MEF，操作程序差不多，但得到的MEF状态却大不相同，有的传到P3都没问题，细胞饱满增殖旺盛；有的刚分离的p0状态都很差，细胞老化严重。请有经验的给分析一下影响MEF的状态的因素有哪些呢？怎么样才能得到状态好的MEF呢？最好从小鼠的饲养开始说起，谢了先！

bobo198666

如果P0状态都不好的话那肯定是你分细胞的问题了

huangcong1988

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  L0 `9 L3 L1 C8 v+ k
现在养细胞，DMEM影响很小的，一般就是血清对于养细胞影响比较大，而且用DMEM和用1640没什么大的差别，另外用gibco的DMEM跟用hyclone high glucose DMEM没什么大的区别，细胞都能养好的，主要还是要选好的血清，最好的是gibco的胎牛血清，其余影响不太大，除非养比较重要的细胞，一般细胞随便的DMEM都行

sarah19860420

回复 huangcong1988 的帖子- d, A' m/ F- U1 a; |

) I& W% _8 ], e6 [% D+ J& i4 bI have got it. thank you so much.

sarah19860420

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想问下相关帖子在哪里找呢

pla269

找正规的代理就行

christophe

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OK,thank you! * G. V+ n& G2 X" P- @
你的意思是hyclone high glucose DMEM还是要订原装进口的吗？大概多少钱一瓶呢？

pla269

鼠的问题是分批次的，很难把握，其实主要你分离的手法，有时越是分不好反而分的很快，可能是研磨的很了，还有你的筛子怎么清理的，好用吗，堵不堵？再有就是现在温度高，考虑一下环境变化，hyclone high glucose DMEM，我也用过，建议从公司代理定，有一次，我刚一开盖，一个黑色杂质就在瓶口，市面上的cibco几乎都是假的

christophe

回复 huangcong1988 的帖子7 Y% t0 w1 r8 f7 V$ \4 j4 K
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呵呵，没关系，还请你给传授一下经验，多谢！

christophe

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7 z# Q5 R1 V$ f
3 s1 p9 Y' b& n: `5 X7 S谢谢你！1 H1 b* M) p1 W8 j' q
最近有一批MEF分离出来的时候感觉状态就不好，以后肯定是越培养越不好了，但不知道是什么因素造成的刚分离就不好，是那些因素影响了母鼠和胚胎的质量呢？盘子也是0.1gelatin包被的，培养基是hyclone high glucose DMEM(不是原装进口，据说是进口粉末配成分装的，五十人民币左右一瓶)+15%FBS+1%NEAA+1%P/S,不知是哪个环节影响的？