请教关于iPS克隆挑取的方法 - ips专区干细胞之家



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查看: 26654\|回复: 9	go 请教关于iPS克隆挑取的方法 [复制链接]

scottist

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楼主

发表于 2011-7-5 16:11 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请问高人，如何更加有效快速的挑取iPS克隆（我做小鼠的）？之前我用20ul的枪在显微镜下挑取，感觉不但速度慢，而且容易将克隆破坏（这个非常令人痛心），同时也容易发生相邻克隆之间污染，所以迫切希望知道其他高效的克隆挑取得方法。请高人不吝赐教，在下感激不尽！

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沙发

发表于 2011-7-6 08:27 |只看该作者

微针

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scottist

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藤椅

发表于 2011-7-6 09:54 |只看该作者

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好办法！十分感谢！能否更详细点？微针哪里可以购得？

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ylqulei

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板凳

发表于 2011-7-6 14:32 |只看该作者

应该用眼科显微镊可以做到

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shihuijunm

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报纸

发表于 2011-7-6 16:56 |只看该作者

用毛细玻璃管在酒精灯上拉成斜的细针，切碎iPS细胞，然后用20μl的枪头吸出来就好了

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chenks

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地板

发表于 2011-7-6 17:37 |只看该作者

用玻璃吸管在酒精灯上拉成针,再连上一个0.22um的滤头,可以用口吸克隆,比较方便.

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前途似锦

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7楼

发表于 2011-7-7 08:13 |只看该作者

回复 scottist 的帖子9 M v( h6 v, A5 q! |

可以用拉针仪，很简单拉个尖就行了

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scottist

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8楼

发表于 2011-7-7 15:18 |只看该作者

感谢各位前辈见仁见智！

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christophe

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9楼

发表于 2011-7-8 10:43 |只看该作者

一个经验是挑的时候不要试图采用将ips周围feeder剥离，只剩下ips colony的方法，最好是用拉好的玻璃针尖直接将ips colony挑起，ips colony很容易就从feeder上剥离起来了，然后用20ul枪头吸取就可以了。如果ips是OG2/Nanog-GFP的，可以在荧光显微镜下操作，就更容易了，你很容易看到克隆被洗到枪头里面。