有关支原体污染的问题

juan880929

请问如果冻的细胞有支原体污染会危及到整个液氮罐吗？
( w1 }% B& o  |" Z实验室发现了支原体污染应该如何消毒呢？
6 c! c; J7 X) Q3 l' M谢谢！

like_gj

貌似支原体也是可以在液氮中保存的，所以如果发现冻存的细胞中有支原体，很可能整个液氮灌都被污染了
, ?" F) j( q. M1 p8 P排除支原体污染的方法，包括使用抗生素、抗血清、裸鼠体内接种、巨噬细胞吞噬、胰酶消化等方法，但没有一种方法是普遍有效的。支原体污染的细胞在支原体被清除后，其细胞特性会发生很大改变，所以当发现有支原体污染时，应该直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株。- T) z$ Z) D6 l# U( ^) C( S" l1 M
曾经听过一个讲座，可以在液氮蒸汽中冻存细胞，这样就可以避免整个液氮灌的污染，建议可以尝试一下

jhu132llh

在液氮蒸汽中冻存细胞
7 \8 s7 M7 l6 u% E( j温度够低吗？

juan880929

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; `7 T3 M% F! P
3 ^; l- e+ x& c' h是培养中的细胞，也不排除细胞在冻存之前已经被污染但是没有发现。液氮罐里冻了已经被污染的细胞会不会污染液氮罐里本来冻存的没有污染的细胞。

juan880929

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$ W  {+ {6 o- a1 ]7 W- G- ?
. {9 j  N' N5 f& H& i0 ^% ^7 j是在液氮中冻的，不是蒸汽冻的

like_gj

是一个老师讲座中讲到的，说是盖上盖子的液氮灌中的温度是梯度变化的，大概在-190到-120左右
/ y, J5 O& M; ?2 m8 r对于保存细胞是足够的
3 k! m8 w0 x3 i5 d- e! P( X这是那个老师的观点，我们实验室还没用试过 ) V) N  x4 M  _- I  T/ c- m
还要请问达人，有没有验证过

christophe

回复 juan880929 的帖子! f. }4 U- D4 T5 l/ n. k/ i4 L

2 Y  H# S2 s* x! h, a& _没事的，我们实验室查出有支原体污染，发现在液氮罐里冻存的最早的老板从国外带来的一种细胞有污染，但是放在一个液氮罐里冻存的其他细胞就没事，如果你是在不放心就把细胞都复苏一下做个检测。
! z) P% N& N1 d/ `( ~" S6 c发现支原体以后我们把受污染的不重要的细胞全部扔掉，共用的试剂全部扔掉换新的，还在一种比较重要的细胞上使用了一种抗支原体的药物，培养几代以后检测支原体呈阴性。

pla269

就是支原体跑到液氮罐中也长不起来啊，你只要把自己的细胞封好就行了，如果封不好，污染到外表面的话，复苏过程中一定要注意泡水时不要污染，所以封口膜还是必要的

牙牙丫丫123

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! F) z6 q3 [2 ~. F: U! x- \4 c$ Y+ k  v$ P3 _0 m+ B
能不能问一下你们所使用的抗支原体的药物是什么？
. L6 l( D, O$ i谢谢！

bllx58

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- P5 v: ^( @* F+ @1 e/ Z6 p; R/ l1 q0 h, P& B: @% {
几家最大的公司都在卖支原体抗，黄色的，按一万X加入到培养基里就好了