骨骼间充质干细胞一般可传代几次？

zx314

最近做骨骼间充质干细胞，想问一下版上高手，这种细胞一般可传代几次，（做一次不容易）如果可以的话能否构建细胞系？方案如何，谢谢

runsong

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6 @" s3 x9 i9 O' N5 V山羊的十几代，9 I) Y! R  E) |8 N: A& F' ?4 u
SV40大T抗原、端粒酶、bmi-1经常用于细胞的永生化，addgene上有这几个基因的慢病毒载体。" F% x2 l& v& T, }( `
http://www.addgene.org/12240/, {2 {/ a4 ]; u& c/ \  w+ j
http://www.addgene.org/12245/' x/ i' f, B6 }
http://www.addgene.org/12246/. ?/ D( i2 `* n1 f! ~$ Y. Z: R
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wangyimei

什么是骨骼间充质干细胞，是骨髓间充质干细胞吗？& |$ h% \  O" Y1 ~% R

gact

wangyimei 发表于 2011-8-1 23:36
2 r6 k  ?* H  Z% |7 |4 H什么是骨骼间充质干细胞，是骨髓间充质干细胞吗？

7 @) H1 M0 \3 i7 v我想应该是一样的吧，，关键词搜不到文献。

皮搋子

我觉得很难构建细胞系。5 W" q: r6 U2 N. L$ l: E- j/ P2 q
5 [* Z* C5 E2 Z2 y! U1 `0 r5 R
骨髓间充质干细胞最大的缺点就是冻存后细胞迅速开始老化变异。
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+ O$ E: B* _. p我做的大鼠在10-20代就开始形态变化。

突击兵之小土豆

最多9代吧，不宜过多传代，要不细胞变异和分化了

bljxs

个人认为不管是临床用还是实验用，3-5代得细胞最理想，形态大小均一，很有活力，7、8代时细胞首先从形态上就变的胖胖的没有立体感，而且胞体内总是有黑色小点，看着就不太舒服。

menghy

构建细胞系估计还是很难的，毕竟不象肿瘤细胞永久化生长的。传代培养后随着代次增长就发生老化了。

zx314

+ d, u9 M, @3 o6 b: w4 }0 l+ C; O! |$ X# l6 C' G
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) V" c* e1 H+ `/ e2 v" [- t' y) \0 J$ D
谢谢大家的帮助，顺便再追问一下，这种细胞传代是有什么注意的问题，首先它长的很慢，我传了两代后就变得胖胖的，几乎不再分裂了，培养基有什么特别的吗？我用的是低糖培养基

runsong

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1 C% [9 x% ~/ k我们用a-mem，也没加啥东西。感觉挺好养的。